[發明專利]一種富含綠原酸類物質金銀花細胞的生產方法

在審

• 申請號: 201711128849.7
• 申請日: 2017-11-15
• 公開（公告）號: CN109757372A
• 公開（公告）日: 2019-05-17
• 發明（設計）人: 熊建華;李冬梅;杜娟;杜華英;胡昭君;羅秋水
• 申請（專利權）人: 江西農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京君智知識產權代理事務所(普通合伙) 11305
• 代理人: 呂世靜

本發明涉及一種富含綠原酸類物質金銀花細胞的生產方法，該方法包括預處理、消毒、配制培養基、愈傷組織、繼代培養、金銀花細胞懸浮培養體系建立與后處理等步驟。本發明方法生產的產品綠原酸酸類物質含量高達9.68％以上，與現有生產方法自然金銀花花蕾綠原酸含量4.82～4.84％(李淼，王永香，孟謹.HPLC法測定金銀花中新綠原酸等8種成分的量[J].中草藥，2014，45(7)：1006～1009)相比提高100～100.83％，生產周期縮短300～330天，通過成本核算確定成本降低70～80％。本發明方法易于實現工業化和自動化生產，便于廣泛推廣使用。

【技術領域】

本發明屬于生物技術領域。更具體地，本發明涉及一種富含綠原酸類物質金銀花細胞的生產方法。

【背景技術】

進入21世紀以來，健康成了人們追求的主題，人們崇尚自然、回歸自然，利用現有的自然資源維持食品安全、防治疾病并保健康復身體，追求生命的自然健康，由此引發植物功能成分高效生產的研究熱潮。

綠原酸，又叫咖啡酰奎寧酸(Cafeoylquinic acid)，是重要的植物次生代謝產物，是植物體在有氧呼吸過程中經莽草酸途徑形成的苯丙素類脂化合物家族，奎寧酸發生酯化因部位不同而分為3-O-咖啡酰奎寧酸(綠原酸)、4-O-咖啡酰奎寧酸(隱綠原酸)、5-O-咖啡酰奎寧酸(新綠原酸)、3,4-二-O-咖啡酰奎寧酸(異綠原酸B)、3,5-二-O-咖啡酰奎寧酸(異綠原酸A)、4,5-二-O-咖啡酰奎寧酸(異綠原酸C)等。綠原酸類物質為許多蔬菜、水果、飲品營養成分之一，也是眾多藥材(如金銀花、茵陳、杜仲)以及中成藥(如復肝寧、雙花注射液、粉刺口服液)的主要有效成分和重要質量指標。

現代藥理研究表明，綠原酸具有多種生物活性，例如抑菌、抗炎、抗氧化、抗腫瘤與預防心血管疾病作用。

在抑菌作用方面，Takahama(Takahama U,Tanaka M,Hirota S.Interactionbetween ascorbic acid and chlorogenic acid during the formation of nitricoxide in acidified saliva[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2008,56(21):10406-10413)研究發現咖啡酰奎寧酸可抑制口腔細菌的滋生，預防牙周炎、牙槽膿腫等口腔疾病，維護口腔環境的健康；Albouchi(Albouchi F,Hassen I,Casabianca H,Hosni K^*.Phytochemicals,antioxidant,antimicrobial and phytotoxic activitiesof Ailanthus altissima(Mill.)Swingle leaves[J].SouthAfrican Journal ofBotany,2013,87(7):164-174)發現富含綠原酸的椿嫩葉能較好地抑制革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌和白色念珠菌；熊建華等人(Xiong J H,Li S C,Wang W J,Hong Y P,Tang K J^*,Luo Q S.Screening and identification of the antibacterial bioactive compoundsfrom Lonicera japonica Thunb.Leaves[J].Food Chemistry,2013,138:327-333；楊鵬飛，熊建華.金銀花葉二-O-咖啡酰奎寧酸在肉品保鮮中的應用及其復合保鮮劑的開發[D].江西農業大學,2014)認為金銀花葉中提取的咖啡酰奎寧酸類物質抑菌效果較好，對肉品有一定防腐作用，可延長冷藏豬肉、鴨肉保質期。