[發(fā)明專利]一種沉默表達WSB2蛋白的慢病毒的構(gòu)建方法及其應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711126521.1
• 申請日: 2017-11-15
• 公開（公告）號: CN109777787A
• 公開（公告）日: 2019-05-21
• 發(fā)明（設計）人: 宋鑫;張一;李真;孟旭東
• 申請（專利權(quán)）人: 信雅生物科技（蘇州）有限公司
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N5/10;C12N15/867;C12N15/113;A61K31/713;A61P35/00
• 代理公司: 上海宣宜專利代理事務所(普通合伙) 31288
• 代理人: 劉君

1.一種構(gòu)建在人黑色素瘤細胞中沉默表達WSB2蛋白的慢病毒的方法，其特征在于：合成RNAi的DNA模板序列

WSB2-RNAi-1：

正義鏈：CTTCGAAGTTTCCTAACAA

反義鏈：GAAGCTTGCCCGGATTGTT

WSB2-RNAi-2：

正義鏈：CGGCTTCTTACGATACCAA

反義鏈：GCCGAAGAATGCTATGGTT

WSB2-RNAi-3：

正義鏈：AGACACTATTACTGGCTTT

反義鏈：TCTGTGATAATGACCGAAA

2.用權(quán)利要求1的方法構(gòu)建的沉默表達WSB2基因的慢病毒，包括LV-shWSB2-1、LV-shWSB2-2、LV-shWSB2-3。

3.用權(quán)利要求1的方法構(gòu)建的WSB2低表達黑色素瘤細胞。

4.如權(quán)利要求2所述的慢病毒在制備治療黑色素瘤藥物方面的應用，其特征在于，能夠在體外抑制黑色素瘤A375細胞的增殖。

5.如權(quán)利要求2所述的慢病毒在制備治療黑色素瘤藥物方面的應用，其特征在于，能夠抑制裸鼠體內(nèi)黑色素瘤細胞的增殖。

6.如權(quán)利要求2所述的慢病毒在制備治療黑色素瘤藥物方面的應用，其特征在于：能夠抑制黑色素瘤A375細胞的轉(zhuǎn)移。

7.如權(quán)利要求2所述的慢病毒在制備治療黑色素瘤藥物方面的應用，其特征在于：能夠阻礙黑色素瘤A375細胞由G1期進入S期。

8.如權(quán)利要求2所述的慢病毒在制備治療黑色素瘤藥物方面的應用，其特征在于：能夠使p53、周期蛋白等增殖相關蛋白水平改變。