[發明專利]撒丁島梭菌7α-羥基類固醇脫氫酶突變體K179M有效
| 申請號： | 201711123463.7 | 申請日： | 2017-11-14 |
| 公開（公告）號： | CN107841489B | 公開（公告）日： | 2020-02-18 |
| 發明（設計）人： | 祝連彩;撖菁萱;姚愷怡;唐士金;王伯初;季順林;婁德帥;譚君 | 申請（專利權）人： | 重慶大學 |
| 主分類號： | C12N9/04 | 分類號： | C12N9/04;C12N15/53;C12P33/02 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129 | 代理人： | 呂小琴 |
| 地址： | 400040 重慶市沙坪壩*** | 國省代碼： | 重慶;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 撒丁島梭菌 羥基 類固醇 脫氫酶 突變體 k179m | ||
1.一種提高野生型撒丁島梭菌 7α-羥基類固醇脫氫酶的酶活及穩定性的方法，其特征在
于，將所述野生型撒丁島梭菌 7α-羥基類固醇脫氫酶第 179 位的賴氨酸突變為甲硫氨酸；所述野生型撒丁島梭菌 7α-羥基類固醇脫氫酶的氨基酸序列如 SEQ ID NO：1 所示。
2.根據權利要求 1 所述的方法，其特征在于，進行所述突變后得到的撒丁島梭菌 7α-羥基類固醇脫氫酶酶突變體的酶活及穩定性相較所述野生型撒丁島梭菌 7α-羥基類固醇脫氫酶顯著提高。
3.一種撒丁島梭菌 7α-羥基類固醇脫氫酶突變體 K179M，其特征在于，其氨基酸序列如
SEQ ID NO：2 所示。
4.編碼權利要求 3 所述的撒丁島梭菌 7α-羥基類固醇脫氫酶突變體 K179M 的基因。
5.根據權利要求 4 所述的基因，其特征在于，其核苷酸序列如 SEQ ID NO：3 所示。
6.一種表達盒，其特征在于，包含權利要求 4 所述的基因。
7.一種載體，其特征在于，包含權利要求 4 所述的基因，和/或權利要求 6 所述的表達盒。
8.一種重組細胞，其特征在于，包含權利要求 4 所述的基因，和/或權利要求 6 所述的表達盒，和/或權利要求 7 所述的載體。
9.一種催化劑，其特征在于，其有效成分包含權利要求3所述的撒丁島梭菌 7α-羥基類固醇脫氫酶突變體 K179M。
10.根據權利要求 9 所述的催化劑，其特征在于，還包括與權利要求 3 所述的撒丁島梭菌 7α-羥基類固醇脫氫酶突變體 K179M 同時使用時能夠提高酶催化效率或增加酶穩定性的其它試劑。
11.一種實現化學物質的羰基不對稱還原的方法，其特征在于，使用權利要求3所述的撒丁島梭菌 7α-羥基類固醇脫氫酶突變體 K179M，和/或權利要求 9 或 10 所述的催化劑與反應底物在 20-50°C、pH 6.0-11.0 條件下進行催化反應。
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