[發(fā)明專利]經(jīng)蛋白酶M酶解的山杏仁蛋白源ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711121194.0
• 申請日: 2017-11-14
• 公開（公告）號: CN107698659B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 顧欣;王建中;李迪;曲留柱;陳林
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶三峽學(xué)院
• 主分類號: C07K5/078
• 分類號: C07K5/078;C07K1/30;C07K1/20;C07K1/16;C12P21/06
• 代理公司: 重慶強(qiáng)大凱創(chuàng)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 50217
• 代理人: 成艷;黃書凱

本發(fā)明提供一種經(jīng)蛋白酶M酶解的山杏仁蛋白源ɑ?葡萄糖苷酶抑制肽，其特征在于：其氨基酸序列為色氨酸?絲氨酸，結(jié)構(gòu)式為：本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種天然的輔助降血糖效果好的經(jīng)蛋白酶M酶解的山杏仁蛋白源ɑ?葡萄糖苷酶抑制肽及其制備方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種經(jīng)蛋白酶M酶解的山杏仁蛋白源ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽及其制備方法。

背景技術(shù)

糖尿病已經(jīng)成為與心腦血管疾病、癌癥、慢性呼吸系統(tǒng)疾病并稱的四大威脅人類健康的慢性病之一。通常糖尿病患者通過攝入胰島素的方法來降低胰島素抵抗的影響。但是患者長期服用胰島素會導(dǎo)致胰島素分泌受損和β-細(xì)胞的損失(Clark,1998)。糖尿病作為一種慢性疾病對患者的正常生活造成極大的不便，患者會產(chǎn)生疲勞感并且嗜睡，患病嚴(yán)重的成年人甚至?xí)适趧幽芰ΑＬ悄虿∪酥委煹奈ㄒ环椒ㄊ欠媒堤穷愃幬铮悄壳伴_發(fā)的降糖藥物主要是以化學(xué)合成或生化試劑為主，并且這些藥物并不能完全治愈糖尿病。因此對副作用小的天然的降糖藥物的研究迫在眉睫。降糖藥物主要分為胰島素及其類似藥物、促胰島素分泌劑、胰島素增敏劑、蛋白質(zhì)糖基化抑制劑、α-葡萄糖苷酶抑制劑、胰島素樣生長因子和醛糖還原酶抑制劑。

α-葡萄糖苷酶抑制劑是一類有效的糖尿病治療藥物，可競爭性抑制小腸內(nèi)各種α-葡萄糖苷酶活性，減緩α-葡萄糖苷酶對碳水化合的消化作用，減慢淀粉分解成葡萄糖的速度及腸道內(nèi)葡萄糖的吸收，降低餐后血糖。目前市售的α-葡萄糖苷酶抑制劑類藥物主要有阿卡波糖(acrbose)、伏格列波糖(voglibose)和米格列醇(midlitol)，但是這類藥物作為處方藥長期服用通常會產(chǎn)生一些副作用，如胃脹氣、腸絞痛、腹脹或腹瀉等。這些藥物都是非水解糖類的類似物，對胰腺中的α-淀粉酶抑制能力較強(qiáng)而對小腸上皮的α-葡萄糖苷酶抑制能力較弱，從而使糖類物質(zhì)在小腸內(nèi)吸收障礙而停留在小腸，導(dǎo)致被腸道細(xì)菌酵解產(chǎn)生較多的氣體，造成人體胃腸道不適。

因此，研發(fā)對小腸上皮的α-葡萄糖苷酶抑制能力較強(qiáng)而對胰腺分泌的α-淀粉酶抑制能力較弱的藥物，一方面減少α-葡萄糖苷酶抑制劑類藥物的副作用，另一方面又控制了餐后血糖水平，是一種理想降糖類藥物的研發(fā)方向。

山杏是傳統(tǒng)的藥用植物，山杏仁是優(yōu)質(zhì)的植物蛋白源，它的氨基酸組成接近世界糧農(nóng)組織FAO的標(biāo)準(zhǔn)，主要由易消化的代謝蛋白組成，具有典型的植物蛋白的物化特性。脫苦處理之后的山杏仁蛋白安全無毒，可以開發(fā)多種有益生理健康的生物活性和醫(yī)用價值。山杏仁蛋白源生物活性肽的研究有著廣闊的前景，近年來，國內(nèi)外學(xué)者對其進(jìn)行了深入的研究。山杏仁蛋白作為優(yōu)質(zhì)的易消化的植物蛋白，也是生物活性肽的良好來源。它具有降血糖、降血脂、降血壓、提高免疫力、抗癌以及抑菌等生物活性，但是山杏仁蛋白源的α-葡萄糖苷酶抑制肽的分離純化和活性研究在國內(nèi)外尚屬于空白領(lǐng)域。本發(fā)明是在發(fā)明人在通過系統(tǒng)地分析山杏仁蛋白及其肽的抗氧化能力，篩選出高純度高活性的α-葡萄糖苷酶抑制肽，并研究山杏仁多肽的體內(nèi)降血糖能力中得到的一種經(jīng)蛋白酶M酶解的山杏仁蛋白源ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽。發(fā)明人在研究的過程中，經(jīng)過先對山杏仁蛋白的提取及其提取工藝，對山杏仁蛋白氨基酸組成分析研究后，再利用蛋白酶酶解山杏仁蛋白得到活性肽，研究得到經(jīng)蛋白酶M酶解的山杏仁蛋白源ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種ɑ-葡萄糖苷酶抑制活性效果好的經(jīng)蛋白酶M酶解的山杏仁蛋白源ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽及其制備方法。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

經(jīng)蛋白酶M酶解的山杏仁蛋白源ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽，其氨基酸序列為色氨酸-絲氨酸，結(jié)構(gòu)式為：

采用本發(fā)明的經(jīng)蛋白酶M酶解的山杏仁蛋白源ɑ-葡萄糖苷酶抑制肽,其實(shí)際分子量為291.31g/mol。通過測定的E的α-葡萄糖苷酶抑制活性IC₅₀值為0.013±0.06mg/mL；以分子量為依據(jù)，以μmol/L為單位，計算得到肽E的IC₅₀值為44.63±0.03μmol/L。