[發明專利]一種海產品中鄰苯二甲酸酯類環境激素的分散固相萃取-氣相色譜-質譜檢測方法

有效

• 申請號: 201711116714.9
• 申請日: 2017-11-13
• 公開（公告）號: CN108008028B
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發明（設計）人: 胡紅美;張露;李鐵軍;郭遠明;孫秀梅;郝青;金衍健
• 申請（專利權）人: 浙江省海洋水產研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/06;G01N30/12;G01N30/08
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

1.一種海產品中鄰苯二甲酸酯類環境激素的分散固相萃取-氣相色譜-質譜檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）樣品的采集和制樣：將待檢測的海產品進行前處理得到塊體樣品，用高速組織搗碎機勻質，得到待測樣品，于-18℃冷凍保存，待測；

（2）取樣和超聲波萃取：稱取2g上述待測樣品，置于玻璃離心管中，加入10～20mL體積比為1:1的正己烷/二氯甲烷萃取劑，渦旋1～3min，以300～400W功率于30～40℃超聲波提取10～20min；當樣品中含硫化合物的背景干擾時，加入1～3g銅粉超聲脫硫，3000～6000r/m高速離心3～5min，取上清液，得到正己烷/二氯甲烷提取液，所述正己烷/二氯甲烷提取液過無水硫酸鈉柱；再向樣品中加入10～20mL正己烷，重復上述過程，得到正己烷提取液；將所述正己烷/二氯甲烷提取液和正己烷提取液合并，得到混合提取液；

（3）濃縮：將步驟（2）得到的混合提取液，在水泵真空度0.08～0.09Mpa，水浴溫度35～40℃，轉速50～100rpm條件下，用旋轉蒸發儀蒸發至干，加入2mL正己烷溶解，得到正己烷溶解液；

（4）分散固相萃取凈化：取150～250mg石墨化炭黑于試管中，加入步驟（3）得到的正己烷溶解液，渦旋30～60s，3000～6000r/m高速離心1～3min，取上清液a；再向上述石墨化炭黑中加入2mL丙酮，重復上述渦旋離心過程，取上清液b；再向上述石墨化炭黑中加入2mL二氯甲烷，重復上述渦旋離心過程，取上清液c；再向上述石墨化炭黑中加入2mL甲醇，重復上述渦旋離心過程，取上清液d；合并上清液a、b、c、d，得到混合上清液；

（5）濃縮定容：將步驟（4）得到的混合上清液在水浴溫度40～50℃下，吹氮氣蒸發至干，用正己烷溶解，并定容至1mL，作為上機溶液；

（6）氣相色譜-質譜檢測器檢測：進樣針抽取上述上機溶液，按照設定好的氣相色譜-質譜條件進行檢測；氣相色譜柱選用HP-35MS毛細管氣相色譜柱；氣相色譜柱升溫程序為：初始溫度100℃，以10℃/min升溫至290℃；保持5.0min，總運行時間24min；

（7）標準曲線繪制：以選擇離子監測模式定性，外標法定量；

（8）回收率測定：將采集到的實際樣品，按照上述步驟（1）～（6）的要求進行操作，并與上述步驟（7）得到的標準曲線比較，通過換算最終得到實際樣品中16種鄰苯二甲酸酯的含量；所述16種鄰苯二甲酸酯為苯二甲酸二甲酯，鄰苯二甲酸二乙酯，鄰苯二甲酸二異丁酯，鄰苯二甲酸二丁酯，鄰苯二甲酸二-4-甲基-2-戊基酯，鄰苯二甲酸二甲氧基乙酯，鄰苯二甲酸二正戊酯，鄰苯二甲酸二乙氧基乙基酯，鄰苯二甲酸二己酯，鄰苯二甲酸丁芐酯，鄰苯二甲酸二-2-乙基己酯，鄰苯二甲酸二丁氧基乙基酯，鄰苯二甲酸二環己酯，鄰苯二甲酸二正辛酯，鄰苯二甲酸二苯酯和鄰苯二甲酸二壬酯；

將不同加標濃度的加標樣品，按照上述步驟（2）～（6）的要求分別進行五次平行操作，并與上述步驟（7）得到的標準曲線比較，通過換算最終得到加標樣品中16種鄰苯二甲酸酯的測定濃度；按照下式進行回收率計算：

；

式中：R——回收率，%；

C_s——加標樣品中16種鄰苯二甲酸酯的測定濃度，μg/kg；

C₀——實際樣品中16種鄰苯二甲酸酯的濃度，μg/kg；

C——加標樣品中16種鄰苯二甲酸酯的理論加標濃度，μg/kg；

所述加標樣品為經步驟（1）預處理后的實際樣品中加入鄰苯二甲酸酯后的樣品。

2.根據權利要求1所述的一種海產品中鄰苯二甲酸酯類環境激素的分散固相萃取-氣相色譜-質譜檢測方法，其特征在于，步驟（1）中，所述待檢測的海產品為魚，蝦，蟹和貝類中的一種。

3.根據權利要求2所述的一種海產品中鄰苯二甲酸酯類環境激素的分散固相萃取-氣相色譜-質譜檢測方法，其特征在于，所述將待檢測的海產品進行前處理的方法為：

魚：去鱗、去皮，沿脊背取肌肉；

蝦、蟹：去頭、去殼、去附肢，取肌肉；

貝類：去殼，取可食部分；

將上述樣品切塊，得到塊體樣品，所述塊體樣品的體積不大于0.5 cm×0.5 cm×0.5cm。