[發(fā)明專利]包埋GDNF的多核-單殼微球緩釋系統(tǒng)的制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711115088.1 | 申請日： | 2017-11-13 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN108042793A | 公開（公告）日： | 2018-05-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 曾文;李維新;高國棟;孫楊 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | A61K38/18 | 分類號(hào)： | A61K38/18;A61K9/52;A61K47/34;A61P25/00 |
| 代理公司： | 西安弘理專利事務(wù)所 61214 | 代理人： | 韓玙 |
| 地址： | 710032 *** | 國省代碼： | 陜西;61 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 包埋 gdnf 多核 單殼微球緩釋 系統(tǒng) 制備 方法 | ||
1.包埋GDNF的多核-單殼微球緩釋系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，具體按照以下步驟實(shí)施：
步驟1、將GDNF溶液、多庫酯鈉及人血清白蛋白溶于蒸餾水中制備出內(nèi)水相W1；將PLGA溶于二氯甲烷中制備油相O1；將聚山梨醇酯80與水的混合制備出外層水相W2；將內(nèi)水相W1分散于油相O1中，經(jīng)超聲分散后制備出初乳液W1/O1；將初乳液W1/O1與外層水相W2混合，經(jīng)超聲分散后制備出雙層終乳液W1/O1/W2；對(duì)雙層終乳液進(jìn)行攪拌，待完全固化后得到包埋GDNF的PLGA微球；
步驟2、將經(jīng)步驟1制備出的包埋GDNF的PLGA微球依次進(jìn)行沖洗、離心及冰凍干燥處理；
步驟3、利用殼聚糖粉末和冰醋酸水溶液制備殼聚糖溶液；將經(jīng)步驟2處理后得到的包埋GDNF的PLGA微球溶解于水中配制成PLGA微球水溶液；將PLGA微球水溶液添加到殼聚糖溶液中制備出水相W；將液體石蠟油與表面活性劑混合制備出油相O；將水相W與油相O混合制備出水/油乳濁液W/O；將三聚磷酸鈉溶液與水/油乳濁液W/O混合制備出乳濁液；對(duì)乳濁液清洗，得到包埋GDNF的多核-單殼微球緩釋系統(tǒng)，
步驟3具體按照以下步驟實(shí)施：
步驟3.1、經(jīng)步驟2后，于2℃～4℃條件下，將100mg～120mg殼聚糖粉末溶解于10mL～12mL冰醋酸水溶液中，制備出殼聚糖溶液；
將經(jīng)步驟2處理后得到的包埋GDNF的PLGA微球溶解于水中配制成2mL～4mL的PLGA微球水溶液，其中包埋GDNF的PLGA微球含量為36mg；
步驟3.2、將步驟3.1中制備出的PLGA微球水溶液添加到殼聚糖溶液中，攪拌均勻后制備出水相W；
將100mL～120mL液體石蠟油與表面活性劑Span80依次注入容器內(nèi)，采用機(jī)械攪拌均勻，攪拌速度控制為300rmp/min～500rmp/min，制備得到油相O；
步驟3.3、經(jīng)步驟3.2后，于4℃條件下，將水相W逐滴加入油相O中，并機(jī)械攪拌1h～2h，機(jī)械攪拌的速度為1000rmp/min～1200rmp/min，制備出水/油乳濁液W/O；
步驟3.4、將20mL～25mL的三聚磷酸鈉溶液逐滴添加到經(jīng)步驟3.3制備出的水/油乳濁液W/O中，機(jī)械攪拌1h～2h，機(jī)械攪拌的速度為1000rmp/min～1200rmp/min，制備出乳濁液；
步驟3.5、將經(jīng)步驟3.4制備出的乳濁液依次用石油醚、異丙醇以及雙蒸水清洗，得到包埋GDNF的多核-單殼微球緩釋系統(tǒng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包埋GDNF的多核-單殼微球緩釋系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，所述步驟1具體按照以下步驟實(shí)施：
步驟1.1、于2℃～4℃條件下，將60μL～100μLGDNF溶液、100mg～120mg多庫酯鈉及7mg～8mg人血清白蛋白共同溶解于0.5mL蒸餾水中，制備出內(nèi)水相W1；
將0.6g～1.0g PLGA溶于6mL二氯甲烷中，制備出油相O1；
將0.6mg聚山梨醇酯80與60mL～70mL水的混合均勻，制備出外層水相W2；
步驟1.2、經(jīng)步驟1.1后，將內(nèi)水相W1分散于油相O1中，用超聲細(xì)胞粉碎機(jī)超聲分散10s～15s，之后暫停10s～15s；再重復(fù)這一過程兩次，得到初乳液W1/O1；
步驟1.3、將經(jīng)步驟1.2得到的初乳液W1/O1添加到步驟1.1中制備的外層水相W2中，用超聲細(xì)胞粉碎機(jī)超聲分散10s～15s，之后暫停10s～15s，重復(fù)這一過程兩次，制備出雙層終乳液W1/O1/W2；
步驟1.4、將經(jīng)步驟1.3制備得到的雙層終乳液采用磁力攪拌器均勻攪拌2h～3h，充分蒸發(fā)有機(jī)溶劑后完全固化，得到包埋GDNF的PLGA微球。
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