[發(fā)明專利]一種禽流感抗原的濃縮純化方法、禽流感抗原有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201711105661.0 | 申請(qǐng)日： | 2017-11-10 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN107779441B | 公開（公告）日： | 2021-04-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 徐進(jìn);駱愛芳;丁少成;郭曉慶;謝梅梅;李厚偉;樊慧麗 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 河南后羿生物工程股份有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N7/02 | 分類號(hào)： | C12N7/02;C12N7/00 |
| 代理公司： | 鄭州睿信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 41119 | 代理人： | 牛愛周 |
| 地址： | 451100 河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 禽流感 抗原 濃縮 純化 方法 | ||
1.一種禽流感抗原的濃縮純化方法，其特征在于，包括以下步驟：
1）將H9亞型禽流感病毒液通過孔徑為1000KD的膜包濃縮至所述禽流感病毒液體積的1/10~1/8，得回流液A；
2）向回流液A中加入滅菌的PBS使其與步驟1）中的禽流感病毒液體積相同，然后通過孔徑為1000KD的膜包濃縮至所述禽流感病毒液體積的1/10~1/8，得回流液B；
3）將回流液B重復(fù)步驟2）中的操作1-5次，得回流液C；
4）向步驟3）所得回流液C中加入NaCl和PEG6000，混勻，3~5℃靜置，然后離心，收集沉淀，即得；
步驟1）中的H9亞型禽流感病毒液在濃縮前依次通過10μm、1μm、0.65μm的切向流微濾中空纖維膜過濾；
步驟1）中的H9亞型禽流感病毒液在通過切向流微濾中空纖維膜過濾前以10000~12000rpm/min的轉(zhuǎn)速離心30~40min。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的禽流感抗原的濃縮純化方法，其特征在于，步驟2）中滅菌的PBS的濃度為0.01mol/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的禽流感抗原的濃縮純化方法，其特征在于，步驟4）中PEG6000的加入量為所述回流液C質(zhì)量的6%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的禽流感抗原的濃縮純化方法，其特征在于，步驟4）中NaCl的加入量為所述回流液C質(zhì)量的4%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的禽流感抗原的濃縮純化方法，其特征在于，步驟4）中的離心為于3~5℃以12000rpm/min的轉(zhuǎn)速離心1h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的禽流感抗原的濃縮純化方法，其特征在于，步驟4）中將收集的沉淀用0.01mol/L滅菌的PBS重懸沉淀。
7.一種禽流感抗原，其特征在于，采用權(quán)利要求1所述的禽流感抗原的濃縮純化方法處理得到。
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