[發明專利]一種礬根品種“黑曜石”組織培養繁殖的方法

在審

• 申請號: 201711097170.6
• 申請日: 2017-11-09
• 公開（公告）號: CN109757369A
• 公開（公告）日: 2019-05-17
• 發明（設計）人: 束曉春;李乃偉;王忠
• 申請（專利權）人: 江蘇省中國科學院植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種礬根品種“黑曜石”組織培養繁殖的方法，該方法包括以下步驟：（1）選取外植體并進行消毒；（2）將處理后的花序軸切割后，進行愈傷組織誘導培養；（3）將愈傷組織進行分化誘導不定芽；（4）將不定芽繼代增殖培養成苗；（5）對繼代增殖培養后的試管苗進行生根培養；（6）煉苗培養。采用該繁殖方法對礬根品種“黑曜石”進行組織培養，一個繼代周期（35d）不定芽增殖率為10倍以上，繁殖速度快，有效解決了種苗繁殖的難題。

技術領域

本發明具體涉及一種礬根（Heuchera micrantha)組織培養的繁殖方法。

背景技術

礬根（Heuchera micrantha)又名珊瑚鈴，為虎耳草科礬根屬多年生草本花卉。其園藝品種繁多，葉色豐富多彩，且不同的季節、環境和溫度下葉片的顏色還會有豐富的變化，是理想的宿根花境材料。目前，礬根植物深受家庭園藝小型花卉愛好者的喜愛，部分品種的電商銷售供不應求。此外，在園林中也有用于林下花境、地被、庭院綠化等，是優良的蔭生環境宿根彩葉花卉。

礬根植物喜半蔭，耐全光，耐低溫，忌過度潮濕，適宜在我國北方種植，南方種植多數品種存在著越夏困難的問題（黃少玲，汪華清，周意峰等，2016，礬根在東莞地區引種馴化過程中的夏季適應性研究，熱帶林業，44(4):4-7）。但礬根植物品種眾多，在華東地區也有適宜粗放管理的品種，如黑曜石、雞尾酒、飴糖、黑曜石等。而其中“黑曜石”品種的適應性最佳，葉片為紅色。較之其他華東地區適生品種，“黑曜石”更加符合園林園藝設計師的需求。

目前，礬根植物的繁殖方式有葉插、分株和組培方式，但前2種方式繁殖速度較慢，不能滿足市場需求。梁芳等采用的分株繁殖，成活率不到50%（5種宿根花卉品種生長習性評價及栽培研究，草原與草坪，2009(6) ：43-46）。因此，建立組織培養快速繁殖體系是解決優良品種種苗短缺的最有效途徑。礬根屬植物的組織培養，已見有報道，但外植體多數選擇新芽或腋芽莖段等，孫國峰等研究培養的銀王子品種繼代繁殖率達15-20倍（礬根雜種‘銀王子＇的組織培養和快速繁殖，植物生理學通訊，2007，43(3):500-500）；章志紅等研究培養的紫宮殿品種繼代繁殖率達9.3倍（美洲礬根品種紫宮殿組織培養與離體快繁研究，江蘇農業科學，2011，(5):69-71）；陳宏等研究培養的‘brownies’品種繼代繁殖率僅3.5倍，且玻璃化嚴重，有效芽少（礬根的組織培養與快速繁殖，上海農業學報，2011，27(4):80-82）。礬根“黑曜石”品種的快繁體系尚未見有報道。組培快繁體系受母本外植體限制，外植體簡單消毒后污染率過高，過度消毒又易形成褐變，無菌系建立比較困難。因此，發明人以花序軸為外植體，建立的礬根品種黑曜石的離體再生快繁體系，為解決黑曜石種苗短缺的重要途徑之一，對礬根的開發和推廣利用都具有著非常重要的意義

發明內容

本發明的目的是為了建立礬根品種黑曜石組織培養繁殖體系。

為了達到上述目的，本發明提供了一種礬根品種“黑曜石”花序軸離體再生體系建立的方法，包括如下步驟：

（1）外植體的選取與消毒：選取生長20d左右的花序軸作為外植體，沖洗干凈后，進行消毒，消毒過程為：用清水沖洗干凈，然后用安利洗滌劑漂洗一次，搖床上振蕩15-20min；流水沖洗20-30min后，于無菌操作臺上用75％乙醇消毒10-20s，立即倒入0.1％的升汞消毒12min，最后用無菌水洗滌4次，每次振蕩3-5min，將消毒完畢的花序軸切割為2cm長的小段。

（2）愈傷組織的誘導：取步驟（1）中處理得到的外植體小段，以斜面放置方式接種于誘導培養基（事先將培養基倒斜面）中進行愈傷組織的誘導，培養溫度為25±2℃，首先在黑暗中培養10d，然后進行光照培養25d；所述光照培養條件為：光照時間為14h/d，光照強度為1500lx；所述誘導培養基為MS+6-BA0.6mg/L+IBA0.02mg/L，pH值為5.8-6.0；