[發明專利]一種礬根品種“黑曜石”組織培養繁殖的方法在審
| 申請號： | 201711097170.6 | 申請日： | 2017-11-09 |
| 公開（公告）號： | CN109757369A | 公開（公告）日： | 2019-05-17 |
| 發明（設計）人： | 束曉春;李乃偉;王忠 | 申請（專利權）人： | 江蘇省中國科學院植物研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 211225 江蘇省南京市溧水縣白*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 組織培養 不定芽 黑曜石 繁殖 繼代增殖培養 愈傷組織誘導 分化誘導 生根培養 有效解決 愈傷組織 種苗繁殖 花序軸 試管苗 外植體 成苗 繼代 煉苗 切割 消毒 | ||
1.一種礬根品種“黑曜石”組織培養繁殖的方法，其特征在于：包括如下步驟：
（1）外植體的選取與消毒：選取生長20d左右的花序軸作為外植體，沖洗干凈后，進行消毒，消毒過程為：用清水沖洗干凈，然后用安利洗滌劑漂洗一次，搖床上振蕩15-20min；流水沖洗20-30min后，于無菌操作臺上用75％乙醇消毒10-20s，立即倒入0.1％的升汞消毒12min，最后用無菌水洗滌4次，每次振蕩3-5min，將消毒完畢的花序軸切割為2cm長的小段；
（2）愈傷組織的誘導：取步驟（1）中處理得到的外植體小段，以斜面放置方式接種于誘導培養基（事先將培養基倒斜面）中進行愈傷組織的誘導，培養溫度為25±2℃，首先在黑暗中培養10d，然后進行光照培養25d；所述光照培養條件為：光照時間為14h/d，光照強度為1500lx；所述誘導培養基為MS+6-BA0.6mg/L+IBA0.02mg/L，pH值為5.8-6.0；
（3）愈傷組織的分化：將步驟（2）中誘導得到的愈傷組織，誘導35d后，在外植體上切下，接入分化培養基進行不定芽分化，培養溫度為25±2℃；光照時間14h/d，光照強度2500lx；所述誘導培養基為N6+CPPU 0.3mg/L+IBA0.01mg/L，pH值為5.8-6.0；
（4）不定芽的繼代增殖：將誘導得到的不定芽切割后，每芽帶0.3cm左右莖段和3-4片葉片，接入繼代增殖培養基中進行繼代培養25d，培養溫度為25±2℃，光照時間為14h/d，光照強度為2500lx；所述繼代增殖培養基為MS＋6-BA0.2mg/L，pH值為5.8-6.0；
（5）根的誘導：將步驟（3）中繼代增殖得到的試管苗接入生根培養基中進行生根培養15d，培養溫度為25±2℃，光照時間為14h/d，光照強度為2000lx；所述生根培養基為MS+2.0mg/L IBA，pH值為5.8-6.0；待不定根長滿瓶底，植株整體生長穩健時，可準備移苗出瓶；
(6) 將培養瓶的瓶蓋打開，煉苗2-3天，移栽入扦插基質中，所述扦插基質優選為：按照2：2：1的體積比例將泥炭土、蛭石和珍珠巖混勻，地上部分噴灑0.1％的多菌靈，每天噴水2次，保證濕度，避免陽光直射。
2.根據權利要求1所述礬根品種“黑曜石”組織培養繁殖的方法，其特征在于，步驟A）中外植體取樣時間為4月份。
3.通過權利要求1所述方法制備的礬根品種“黑曜石”種苗。
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