[發明專利]一種一步檢出唾液中毒品四項的方法

在審

• 申請號: 201711097145.8
• 申請日: 2017-11-09
• 公開（公告）號: CN107884577A
• 公開（公告）日: 2018-04-06
• 發明（設計）人: 司英杰;史晉海;王少雄;王興和;劉偉;向榮
• 申請（專利權）人: 成都中昆德潤科技有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/531;G01N33/532
• 代理公司: 成都金英專利代理事務所(普通合伙)51218
• 代理人: 袁英

1.一種一步檢測唾液中毒品四項的方法，其特征在于，采用苯胺還原法制備膠體金顆粒，標記冰毒抗體、可卡因抗體、嗎啡抗體、K粉抗體并均勻涂布于膠體金墊上，作為示蹤標記物；在硝酸纖維素膜上，分別將特定濃度的MET-BSA、COC-BSA、MOP-BSA、KET-BSA偶聯物固定于四個檢測線，即T1、T2、T3、T4線，羊抗鼠二抗固定于質控線，即C線；依次將樣本墊、膠金墊、硝酸纖維素膜和吸水濾紙組裝，剪成膠體金試紙并裝入檢測卡中；金標抗體與相應的抗原、抗體發生特異性結合被截留而顯色，根據T線、C線顯色與否來判斷檢測結果。

2.根據權利要求1中的方法，其特征在于膠體金標記物通過以下步驟進行制備：先配制膠體金溶液，再制備膠體金標記物。

3.根據權利要求2中的方法，其特征在于膠體金溶液的配置通過以下步驟進行：

（1）配制0.25%氯金酸溶液；

（2）配制1%-2%苯胺溶液；

（3）配制3%-5%十二烷基硫酸鈉；

（4）將100ml0.25%的氯金酸溶液加熱至沸騰，迅速加入1%-2%的苯胺溶液1ml以及20μL3%-5%的十二烷基硫酸鈉；

（5）溶液由淺藍色，深藍，再加熱出現酒紅色，繼續煮沸20min；停止加熱，繼續攪拌至室溫。

4.根據權利要求3中的方法，其特征在于配制的氯金酸溶液濃度為0.25%。

5.根據權利要求3中的方法，其特征在于配制的苯胺溶液濃度為1%-2%。

6.根據權利要求3中的方法，其特征在于配制的十二烷基硫酸鈉溶液濃度為3%-5%。

7.根據權利要求3中的方法，其特征在于膠體金標記物的制備通過以下步驟進行：

（1）取八個1.5 mL試管，分別加入1 mL膠體金溶液；

（2）加入適量K₂CO₃把pH調整為8.0；

（3）其中兩個管各加入5μg/mL MOP抗體、兩個管各加入12μg/mLMET抗體、兩個管各加入8μg/mLKET抗體、兩個管各加入9μg/mLCOC抗體，抗體混勻，振蕩30min；

（4）加入一定量甘油，混勻，振蕩30min；

（5）8000rpm離心5min，輕輕吸除上清；

（6）用100mL膠體金復溶液重懸浮膠體金沉淀制成濃縮液

（7）用復溶液將上述濃縮液稀釋到適當的比例；

（8）玻璃纖維素膜點樣，形成膠金墊，真空凍干3小時。

8.根據權利要求7中的方法，其特征在于步驟（4）中加入10-15μL1%的甘油。