[發明專利]一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置及方法

在審

• 申請號: 201711097010.1
• 申請日: 2017-11-09
• 公開（公告）號: CN107641593A
• 公開（公告）日: 2018-01-30
• 發明（設計）人: 呂峰;陳敏;石小軍;蔡銀杰;鄭興國
• 申請（專利權）人: 南通科技職業學院
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12Q1/6816
• 代理公司: 北京華智則銘知識產權代理有限公司11573
• 代理人: 陳向敏

技術領域

本發明涉及基因檢驗械技術領域，具體來說，涉及一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置及方法。

背景技術

轉基因技術的原理是將人工分離和修飾過的優質基因，導入到生物體基因組中，從而達到改造生物的目的。這一技術稱之為人工轉基因技術，人工轉基因技術就是把一個生物體的基因轉移到另一個生物體DNA中的生物技術。具有不確定性。常用的方法和工具包括顯微注射、基因槍、電破法、脂質體等。轉基因最初用于研究基因的功能，即把外源基因導入受體生物體基因組內，觀察生物體表現出的性狀，達到揭示基因功能的目的。

目前市面上有大量的轉基因植物，但是相應的鑒別裝置卻少之又少，本領域的技術人員希望可以研發出鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置，以滿足市場上的需要。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種的鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置。

為解決上述問題，本發明采用如下技術方案：

一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置，包括發泡載板，所述發泡載板上表面和下表面均設置有指槽，所述發泡載板上表面設置有嵌入槽，所述嵌入槽內設置有正電荷薄膜，所述嵌入槽的槽壁上鑲嵌有連接鏈母鏈，所述正電荷薄膜的邊沿上均設置有翻邊形成槽狀，所述翻邊上均設置有與連接鏈母鏈相配對的連接鏈子鏈，所述正電荷薄膜上設置有儲物槽，所述儲物槽呈矩形陣列分布，所述儲物槽內設置有外源基因探針，所述發泡載板上設置有用于蓋住嵌入槽的護罩，所述護罩為透明設置，所述護罩上設置有插入部，所述發泡載板上設置有與插入部相契合的插入孔，所述插入孔為通孔，所述插入部插入插入孔內，所述發泡載板和護罩通過插入部和插入孔可拆卸連接；

所述發泡載板由按重量份數配比的綠碳化硅15-17份、碳纖維絲44-48份、玻璃纖維絲57-75份、空心玻璃微珠5-11份、硼纖維15-20份、萜烯樹脂18-28份、松香90-133份、柯巴樹脂44-53份、硬脂酸鎂1-4份、酒石酸1-3份、氣相白炭黑13-15份、阿拉伯膠19-23份和碳酸氫鈉6-9份組成。

作為優選，所述插入孔的孔壁上設置有橡膠墊，所述橡膠墊與插入孔的孔壁粘合，所述橡膠墊設置有一個以上，所述橡膠墊呈環形陣列分布，通過設置有橡膠墊，可以有效的防止插入部輕易的脫離插入孔。

作為優選，所述護罩與插入部為一體式設置，護罩與插入部結構穩定，連接可靠。

作為優選，所述所說正電荷薄膜為氨基硅烷膜。

作為優選，所述連接鏈母鏈和連接鏈子鏈均呈波浪狀設置，采用了波浪狀的設計，可以在有限的空間內極大的增加連接面積，提升連接穩定性。

作為優選，所述翻邊與連接鏈子鏈為一體式設置，翻邊與連接鏈子鏈整體性好，結構穩定。

作為優選，所述連接鏈母鏈和連接鏈子鏈分別為PE雙牙密封鏈母鏈和PE雙牙密封鏈子鏈，PE雙牙密封鏈母鏈和PE雙牙密封鏈子鏈具有良好的密封效果，而且連接穩定。

作為優選，所述外源基因探針為35S啟動子或FMV35S啟動子或Nos終止子或NPTII基因或CryI(AC)基因或Cry9c基因或改造的CP4-EPSPS基因或35s-CTP2或CP4-EPSPS基因或GOX基因或Bar基因或Barnase基因或Barstar基因或CryIA(a)基因或Lectin基因或Napin基因或Zein基因或Sad1基因或Lat52基因或外源基因片段中的一種或多種。

本發明要解決的另一技術問題是提供一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置的鑒別方法，包括以下步驟：

1)將35S啟動子、FMV35S啟動子、Nos終止子、NPTII基因、CryI(AC)基因、Cry9c基因、改造的CP4-EPSPS基因、35s-CTP2、CP4-EPSPS基因、GOX基因、Bar基因、Barnase基因、Barstar基因、CryIA(a)基因、Lectin基因、Napin基因、Zein基因、Sad1基因進行點制處理，點入儲物槽內，制得外源基因探針。

2)將5μg聚合酶鏈式反應擴增產物用于100℃的純水煮5min進行變性后，直接放入冰上冷卻3-5min，制得預雜交液以備外源基因探針雜交用；將外源基因探針用0.25M的磷酸緩沖液進行潤濕后，往外源基因探針加入預雜交液在60℃進行預雜交10-12小時1用洗膜液洗滌2次，每次20min；然后進行染色5-10min；用TE緩沖液漂洗5-10min，重復2次；在254nm紫外光下或熒光顯微鏡下進行信號檢測，得出結果。

發泡載板的制備方法，包括以下步驟：