[發明專利]一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置及方法

在審

• 申請號: 201711097010.1
• 申請日: 2017-11-09
• 公開（公告）號: CN107641593A
• 公開（公告）日: 2018-01-30
• 發明（設計）人: 呂峰;陳敏;石小軍;蔡銀杰;鄭興國
• 申請（專利權）人: 南通科技職業學院
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12Q1/6816
• 代理公司: 北京華智則銘知識產權代理有限公司11573
• 代理人: 陳向敏

1.一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置，其特征在于：包括發泡載板，所述發泡載板上表面和下表面均設置有指槽，所述發泡載板上表面設置有嵌入槽，所述嵌入槽內設置有正電荷薄膜，所述嵌入槽的槽壁上鑲嵌有連接鏈母鏈，所述正電荷薄膜的邊沿上均設置有翻邊形成槽狀，所述翻邊上均設置有與連接鏈母鏈相配對的連接鏈子鏈，所述正電荷薄膜上設置有儲物槽，所述儲物槽呈矩形陣列分布，所述儲物槽內設置有外源基因探針，所述發泡載板上設置有用于蓋住嵌入槽的護罩，所述護罩為透明設置，所述護罩上設置有插入部，所述發泡載板上設置有與插入部相契合的插入孔，所述插入孔為通孔，所述插入部插入插入孔內，所述發泡載板和護罩通過插入部和插入孔可拆卸連接，所述發泡載板由按重量份數配比的綠碳化硅15-17份、碳纖維絲44-48份、玻璃纖維絲57-75份、空心玻璃微珠5-11份、硼纖維15-20份、萜烯樹脂18-28份、松香90-133份、柯巴樹脂44-53份、硬脂酸鎂1-4份、酒石酸1-3份、氣相白炭黑13-15份、阿拉伯膠19-23份和碳酸氫鈉6-9份組成,所述插入孔的孔壁上設置有橡膠墊，所述橡膠墊與插入孔的孔壁粘合，所述橡膠墊設置有一個以上，所述橡膠墊呈環形陣列分布。

2.根據權利要求1所述的一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置，其特征在于：所述護罩與插入部為一體式設置。

3.根據權利要求2所述的一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置，其特征在于：所述所說正電荷薄膜為氨基硅烷膜。

4.根據權利要求3所述的一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置，其特征在于：所述連接鏈母鏈和連接鏈子鏈均呈波浪狀設置。

5.根據權利要求4所述的一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置，其特征在于：所述翻邊與連接鏈子鏈為一體式設置。

6.根據權利要求5所述的一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置，其特征在于：所述連接鏈母鏈和連接鏈子鏈分別為PE雙牙密封鏈母鏈和PE雙牙密封鏈子鏈。

7.根據權利要求6所述的一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置，其特征在于：所述外源基因探針為35S啟動子或FMV35S啟動子或Nos終止子或NPTII基因或CryI(AC)基因或Cry9c基因或改造的CP4-EPSPS基因或35s-CTP2或CP4-EPSPS基因或GOX基因或Bar基因或Barnase基因或Barstar基因或CryIA(a)基因或Lectin基因或Napin基因或Zein基因或Sad1基因或Lat52基因或外源基因片段中的一種或多種。

8.一種鑒別植物轉基因和非轉基因的裝置的鑒別方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將35S啟動子、FMV35S啟動子、Nos終止子、NPTII基因、CryI(AC)基因、Cry9c基因、改造的CP4-EPSPS基因、35s-CTP2、CP4-EPSPS基因、GOX基因、Bar基因、Barnase基因、Barstar基因、CryIA(a)基因、Lectin基因、Napin基因、Zein基因、Sad1基因進行點制處理，點入儲物槽內，制得外源基因探針。

2)將5μg聚合酶鏈式反應擴增產物用于100℃的純水煮5min進行變性后，直接放入冰上冷卻3-5min，制得預雜交液以備外源基因探針雜交用；將外源基因探針用0.25M的磷酸緩沖液進行潤濕后，往外源基因探針加入預雜交液在60℃進行預雜交10-12小時，用洗膜液洗滌2次，每次20min；然后進行染色5-10min；用TE緩沖液漂洗5-10min，重復2次；在254nm紫外光下或熒光顯微鏡下進行信號檢測，得出結果。