[發(fā)明專利]一種用于胰腺癌診療一體化的納米探針及其制備方法和應(yīng)用

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• 申請日: 2017-11-07
• 公開（公告）號: CN108096588A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王中秋;宋麗娜;陳曉;童明敏
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇省中醫(yī)院
• 主分類號: A61K49/12
• 分類號: A61K49/12;A61K49/08;A61K49/10;A61K49/18;B82Y5/00;B82Y15/00;A61K47/36;A61K47/02;A61K47/26;A61K9/00;A61P35/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 黃天天

本發(fā)明公開了一種用于胰腺癌診療一體化的納米探針，其以survivin mRNA作為腫瘤靶點，通過殼聚糖對三氧化二鐵納米顆粒表面進行修飾及對survivin反義寡聚脫氧核苷酸進行羧基化修飾，在偶聯(lián)劑EDC/NHS的作用下，使殼聚糖修飾的三氧化二鐵納米顆粒與羧基化的survivin反義寡聚脫氧核苷酸進行反應(yīng)，獲得以survivin mRNA為靶點的診療一體化納米探針。本發(fā)明同時公開了上述納米探針的制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明的納米探針可以提高腫瘤細胞對survivin反義寡聚脫氧核苷酸的攝取，既可以實現(xiàn)磁共振活體成像又可抑制腫瘤生長，具有腫瘤靶向、磁性、治療等多功能的特性。這種多功能納米探針能夠用于腫瘤活細胞及活體腫瘤靶向磁共振成像以及腫瘤治療。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明主要涉及腫瘤檢測、分子影像應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及一種用于胰腺癌診療一體化的納米探針及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

胰腺癌是我國較常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率呈逐漸上升的趨勢。胰腺癌惡性程度高，預(yù)后差，多數(shù)患者確診時已處于晚期，手術(shù)切除率低，5年生存率低于5％。傳統(tǒng)的檢查方法如CT、MR、超聲、MRCP及ERCP等，主要基于形態(tài)學(xué)上對胰腺癌進行診斷，但大多特異性和敏感性差，不能發(fā)現(xiàn)侵襲前病變及早期癌癥，因此誤診率較高。臨床上常用的血清生物標記物是CA19-9，但其應(yīng)用價值有限；內(nèi)鏡超聲、內(nèi)鏡逆行胰膽管造影等侵襲性內(nèi)鏡檢查對胰腺有潛在損傷，并且高度依賴于操作者水平；腹部斷層成像(CT、MRI)雖能發(fā)現(xiàn)一些病變，但這些檢查手段主要是基于腫塊大體形態(tài)學(xué)的改變來發(fā)現(xiàn)病變，發(fā)現(xiàn)并確診為胰腺癌時，多數(shù)已經(jīng)到達中晚期，該患者失去了徹底根治的機會。

分子影像學(xué)是使用現(xiàn)代化的分子影像設(shè)備，利用腫瘤異常高表達的基因、蛋白等分子監(jiān)測腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的這些異常分子的表達狀況，來早期診斷和早期干預(yù)治療惡性腫瘤。這種技術(shù)具有的優(yōu)勢主要是：一方面是在分子水平異常進行的診斷和治療，可以在腫瘤的早期進行；另一方面是由于針對特異性的基因等分子靶點進行的診療，具有達到個性化靶向診療特點，將極大的提高對腫瘤的診治水平，改善患者預(yù)后。因此，可以認為該種技術(shù)有巨大潛在的科研意義和臨床應(yīng)用價值，有廣闊的市場應(yīng)用前景。目前分子影像手段包括放射性核素分子顯像、磁共振分子成像、超聲分子成像、光學(xué)分子成像及多模式分子影像成像技術(shù)等。核素成像、超聲分子成像及光學(xué)成像分別存在電離輻射、空間分辨率差及組織穿透力弱等缺點。磁共振成像可以提供細膩的軟組織對比度，揭示形態(tài)學(xué)與解剖學(xué)上的細節(jié)，具有一定優(yōu)勢。

超順磁性納米顆粒(Superparamagnetic iron oxide nanoparticle，SPION)因具有良好的靶向性、超順磁性、生物降解性、有功能基團等優(yōu)點，生物學(xué)領(lǐng)域的研究中日益受到重視，并廣泛應(yīng)用于磁共振成像、細胞分離與基因載體、生物分子等方面。經(jīng)過表面修飾后能提高他們的生物相容性。SPINO屬于水溶性液體，研究表明對納米顆粒進行表面修飾，不僅可以提高生物相容性和轉(zhuǎn)染效率，同時可以提供特定的活性基團用于與其它生物分子連接。超順磁性氧化鐵納米顆粒為磁共振T2WI的陰性對比劑，可顯著降低T2信號。

單一的MRI造影劑如磁性氧化鐵納米顆粒難以靶向腫瘤細胞或組織。靶點的選擇對于分子影像至關(guān)重要。目前很多胰腺癌特異表達的蛋白應(yīng)被用于分子影像領(lǐng)域，如uPAR,claudin-4,IGF-1R,CA19.9等。但是多數(shù)文獻都是采用多肽或抗體作為靶向分子，通過抗原-抗體或受體-配體相互結(jié)合。反義寡聚脫氧核苷酸-靶基因mRNA也是靶向探針與生物分子之間的結(jié)和的重要方式之一。目前已有文獻采用放射性核素標記反義寡聚脫氧核苷酸作為探針，實現(xiàn)乳腺癌等腫瘤檢測。

Survivin是一種凋亡抑制基因，可以在多種腫瘤細胞和組織中表達。80-90％的胰腺癌組織中大量表達survivin，而正常胰腺組織中表達量很少。由此可見，Survivin可作為胰腺癌靶向成像的靶點之一。但是目前尚未有研究通過構(gòu)建survivin靶向反義寡聚脫氧核苷酸納米探針來實現(xiàn)早期檢測胰腺癌之目的，同時還可以進行胰腺癌靶向基因治療。

發(fā)明內(nèi)容