[發(fā)明專利]一種淡紫擬青霉菌劑的固體培養(yǎng)生產(chǎn)方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201711080308.1
• 申請日: 2017-11-06
• 公開（公告）號: CN107586730A
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發(fā)明（設計）人: 王友福
• 申請（專利權(quán)）人: 王友福
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/79
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種淡紫擬青霉菌劑的固體培養(yǎng)生產(chǎn)方法，其特征在于，所述一種淡紫擬青霉菌劑的固體培養(yǎng)生產(chǎn)方法包括以下步驟：菌體分離培養(yǎng)、一級種子平板培養(yǎng)、二級種子固體培養(yǎng)、穩(wěn)定處理、三級種子固體培養(yǎng)、規(guī)模固體培養(yǎng)。

2.一種淡紫擬青霉菌劑的固體培養(yǎng)生產(chǎn)方法，其特征在于，所述一種淡紫擬青霉菌劑的固體培養(yǎng)生產(chǎn)方法包括以下步驟：

1）菌體分離培養(yǎng)：用淡紫擬青霉菌株在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，并進行轉(zhuǎn)管培養(yǎng)；

2）一級種子平板培養(yǎng)：向轉(zhuǎn)管培養(yǎng)后的菌種管中加入含吐溫80的無菌水，制成孢子懸浮液，吸取孢子懸浮液接到PDA平板培養(yǎng)基上在溫箱里培養(yǎng)；

3）二級種子固體培養(yǎng)：將麩皮和玉米粉混合得料，水和料混合，滅菌；接種孢子懸浮液后培養(yǎng)，待料表面全部變白后，移入室溫條件下繼續(xù)培養(yǎng)；

4）穩(wěn)定處理：將二級種子放入恒溫箱，以0.5-1℃的升溫速率升溫至28℃，然后以0.5-1℃的降溫速率降溫至-4℃，再升溫至25℃；

5）三級種子固體培養(yǎng)：將二級種子菌種和水、料混合，連續(xù)培養(yǎng) 2-10天；

6）規(guī)模固體培養(yǎng)：所述的規(guī)模培養(yǎng)，包括培養(yǎng)料的準備、混合方法、平面培養(yǎng)和粉粹包裝。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種淡紫擬青霉菌劑的固體培養(yǎng)生產(chǎn)方法，其特征在于，所述穩(wěn)定處理，將二級種子放入恒溫箱，22℃保持45min后，以0.5-1℃的升溫速率升溫至28℃，恒溫40min，然后以0.5-1℃的降溫速率降溫至-4℃，恒溫15min，再以1.5-2℃的升溫速率升溫至25℃，保持恒溫。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種淡紫擬青霉菌劑的固體培養(yǎng)生產(chǎn)方法，其特征在于，所述二級種子固體培養(yǎng)，將麩皮和玉米粉按10-1:1的比例混合得料，水和料按1：1-10比例混合，滅菌；接種孢子懸浮液，置于25℃溫箱培養(yǎng)，待料表面全部變白后，3天翻料一次，移入室溫條件下繼續(xù)培養(yǎng)10d。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種淡紫擬青霉菌劑的固體培養(yǎng)生產(chǎn)方法，其特征在于，所述三級種子固體培養(yǎng)，將麩皮和玉米粉按10-1:1的比例混合，二級種子淡紫擬青霉菌種和水、料按1：10-100:1-100的比例混合，然后將培養(yǎng)料鋪在瓷盤上，在室溫條件下培養(yǎng)，控制好溫度，連續(xù)培養(yǎng) 2-10天，然后封閉陰干后粉粹，包裝存放。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種淡紫擬青霉菌劑的固體培養(yǎng)生產(chǎn)方法，其特征在于，所述三級種子固體培養(yǎng)，培養(yǎng)料鋪在瓷盤上的厚度為1-10cm。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種淡紫擬青霉菌劑的固體培養(yǎng)生產(chǎn)方法，其特征在于，所述平面培養(yǎng)，將混合后的培養(yǎng)料攤鋪在平整的地面上，厚度為1-10cm，在18-28℃條件下進行發(fā)酵培養(yǎng)；1天后和培養(yǎng)基干燥結(jié)塊，在培養(yǎng)基內(nèi)布滿白色菌絲后翻動一次，連續(xù)培養(yǎng)2-10天后，進行通風陰干。

8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種淡紫擬青霉菌劑的固體培養(yǎng)生產(chǎn)方法，其特征在于，所得到的一種淡紫擬青霉菌劑，有效孢子量為2.0-2.2×10⁸cfu/g，雜菌率≤0.1%，脫落率≤3%。