[發(fā)明專利]16到18度黃酒非糖固形物簡(jiǎn)便快速測(cè)定方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711074965.5
• 申請(qǐng)日: 2017-11-06
• 公開（公告）號(hào): CN107817222A
• 公開（公告）日: 2018-03-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 洪佳欣;陳如凱
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 洪佳欣
• 主分類號(hào): G01N21/33
• 分類號(hào): G01N21/33;G01N21/78
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及非糖固形物檢測(cè)方法，特別涉及一種16到18度黃酒非糖固形物簡(jiǎn)便快速測(cè)定方法。

背景技術(shù)

黃酒是我國(guó)的特色酒種，其色澤明亮、香氣濃郁、甘甜味美、風(fēng)味醇厚，并含有豐富的氨基酸、小分子糖類、有機(jī)酸、維生素和微量元素等。黃酒由于其營(yíng)養(yǎng)豐富、酒精度低且具有獨(dú)特的風(fēng)味口感和功效而深受廣大人民群眾的喜愛。非糖固形物是酒樣中除糖外的非揮發(fā)性組分的統(tǒng)稱，其在黃酒中的占比很小通常不足3%。雖然含量低，非糖固形物作用卻很大，它很大程度上決定了黃酒的色澤、滋味、營(yíng)養(yǎng)和功效，是黃酒品質(zhì)等級(jí)評(píng)定的一項(xiàng)重要指標(biāo)。按照國(guó)標(biāo)GB/T 13662-2008《黃酒》中參數(shù)，同一類型的黃酒中非糖固形物含量越高，黃酒的品質(zhì)越好、口味越佳。

現(xiàn)行的黃酒國(guó)標(biāo)中采用的是4h烘干法來測(cè)定酒樣中的非糖固形物含量，這種方法耗時(shí)長(zhǎng)，而且存在酒樣烘干4h后質(zhì)量未達(dá)到恒重的情況，不利于快速測(cè)定、精確測(cè)量和批量檢測(cè)。此外，還有基于近紅外光譜建立的酒樣非糖固形物快速測(cè)定方法，但是這種方法需要借助于貴重的設(shè)備，而且需要耗費(fèi)較高的檢測(cè)成本。因此目前亟需建立準(zhǔn)確可靠、簡(jiǎn)便快速且經(jīng)濟(jì)實(shí)用的黃酒非糖固形物測(cè)定方法。

乙醇含量即酒精度和總糖含量是黃酒的必測(cè)指標(biāo)，單位體積的酒樣質(zhì)量可以很容易稱定，此時(shí)若能測(cè)出酒樣中乙醇水體系的總質(zhì)量，則酒樣質(zhì)量減去乙醇水體系質(zhì)量再減去總糖就可以得到非糖固形物質(zhì)量。本發(fā)明利用特定雙鏈DNA片段在不同水和乙醇質(zhì)量體積比的乙醇水體系中變性程度不同導(dǎo)致260nm波長(zhǎng)下吸光度有所差異，從而建立起一種全新的16到18度黃酒中非糖固形物測(cè)定方法，具有準(zhǔn)確可靠、簡(jiǎn)便快速且經(jīng)濟(jì)實(shí)用的特點(diǎn)，適合于酒廠檢測(cè)實(shí)際需求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供16到18度黃酒非糖固形物簡(jiǎn)便快速測(cè)定方法。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為，16到18度黃酒非糖固形物簡(jiǎn)便快速測(cè)定方法的主要步驟如下：

（1）在黃酒品質(zhì)檢測(cè)中，按照現(xiàn)行國(guó)標(biāo)先測(cè)定其酒精度v這一必測(cè)指標(biāo)，同時(shí)稱定1L酒樣質(zhì)量Mo，測(cè)定酒樣的溫度并據(jù)此查詢乙醇密度ρ。

（2）移取320ul室溫待測(cè)黃酒酒樣到空的酶標(biāo)板中，加入40ul初始變性劑和40ul特定雙鏈DNA片段并充分混勻后靜置4min，同時(shí)設(shè)置對(duì)照孔為320ul待測(cè)酒樣加40ul初始變性劑加40ul蒸餾水，待測(cè)酒樣和對(duì)照均取平行測(cè)三次，樣本處理好后將酶標(biāo)板置于酶標(biāo)儀中。

（3）設(shè)定好酶標(biāo)儀程序在260nm波長(zhǎng)下測(cè)定樣品孔和對(duì)照孔中的吸光度，則樣品的平均吸光度減去對(duì)照的平均吸光度即為樣品中特定雙鏈DNA片段的實(shí)際吸光度x。將x代入關(guān)系式y(tǒng)=-7.2617x+6.2683中則可算出酒樣中水和乙醇的質(zhì)量體積比y，則酒樣中總固形物含量M=Mo-10×ρ×v-10×y×v也即M=Mo-10×（ρ+y）×v，進(jìn)而非糖固形物含量m=M-Mt，Mt為總糖含量。

其中，步驟（1）中所述的黃酒是指國(guó)標(biāo)法測(cè)定酒精度v大于等于16.0且小于等于18.0的黃酒；所述酒精度v是黃酒品質(zhì)檢測(cè)的必測(cè)指標(biāo)，原本就有可直接采用；所述1L酒樣質(zhì)量Mo的測(cè)定方法為：在按國(guó)標(biāo)法測(cè)定酒樣酒精度時(shí)，量取100ml酒樣后稱量裝有酒樣的容量瓶重，則該重量扣除空容量瓶重即為100ml酒樣重量，經(jīng)換算即可得到1L酒樣質(zhì)量Mo，其單位為g/L；所述酒樣溫度為正常室溫即可，優(yōu)選地，控制在30.0±5.0℃之間。

其中，步驟（2）中所述的初始變性劑是10%質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)的尿素和10%體積體積分?jǐn)?shù)的甲酰胺混合水溶液，即每100ml初始變性劑中含有10g的尿素和10ml的甲酰胺；所述的特定雙鏈DNA片段，其序列如SEQ ID NO：1所示，濃度為22umol。

其中，步驟（3）中所述的平均吸光度是指三個(gè)平行的吸光度的算術(shù)平均值；所述總固形物含量M=Mo-10×ρ×v-10×y×v，其中10×ρ×v即乙醇密度乘以酒精度也就是100ml酒樣的乙醇體積含量再乘以10，就可以得到1L酒樣中的乙醇質(zhì)量；而10×y×v即乙醇體積乘以水和乙醇的質(zhì)量體積比再乘以10，就可以得到1L酒樣中的水質(zhì)量，則10×（ρ+y）×v實(shí)際上就是1L酒樣中乙醇水體系的質(zhì)量之和；因此總固形物含量M=Mo-10×（ρ+y）×v，也即1L酒樣總質(zhì)量減去其中的乙醇水體系質(zhì)量則為1L酒樣中的總固形物含量，其單位為g/L；進(jìn)而非糖固形物含量等于總固形物含量減去總糖含量也即m=M-Mt，而總糖含量Mt是黃酒品質(zhì)檢測(cè)的必測(cè)指標(biāo)，原本就有可直接采用，其單位為g/L。