[發(fā)明專利]檢測PCM1-JAK2相對表達量的方法、試劑盒和寡核苷酸

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711071291.3
• 申請日: 2017-11-03
• 公開（公告）號: CN107815494B
• 公開（公告）日: 2021-07-13
• 發(fā)明（設計）人: 劉趙玲;吳鵬飛;王淑一
• 申請（專利權）人: 合肥艾迪康醫(yī)學檢驗實驗室有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100
• 代理人: 黃素萍

1.定量檢測樣本中PCM1-JAK2融合基因相對表達量的寡核苷酸，其特征在于，所述寡核苷酸包括檢測用上游引物PCM1-JAK2-E36/E9-F、PCM1-JAK2-E25/E9-F，下游引物PCM1-JAK2-E36/E9-R、PCM1-JAK2-E36/E7-R、PCM1-JAK2-E25/E9-R，探針PCM1-E36-Probe和PCM1-E25-Probe，其堿基序列如下所示：

PCM1-JAK2-E36/E9-F：CCCTTTGCCGTTACGTTTACC

PCM1-JAK2-E25/E9-F：TACAACCTCAGTGGGACAAAGAA

PCM1-JAK2-E36/E9-R：TCCCACTCAGGTTGTACTCTTCA

PCM1-JAK2-E36/E7-R：TGATGTGCATCTGCAGTTAATCTATAA

PCM1-JAK2-E25/E9-R：GTGGACGAGATTCATTTTGTGAAATT

PCM1-E36-Probe：FAM-TCCTGAAAGCTCTCTGGCTGGAAGTCC-TAMRA

PCM1-E25-Probe：FAM-CTGGGAGTGATTTTTCCATGTTTGAAGCT-TAMRA。

2.如權利要求1所述的寡核苷酸，其特征在于，所述寡核苷酸還包括內(nèi)參基因Abl上游引物Abl-F、下游引物Abl-R和探針Abl-Probe，其堿基序列如下所示：

Abl-F：GATACGAAGGGAGGGTGTACCA

Abl-R：CTCGGCCAGGGTGTTGAA

Abl-Probe：FAM-GCTTCTGATGGCAAGCTCTACGTCTCCT-TAMRA。

3.如權利要求1所述的寡核苷酸，其特征在于，所述PCM1-JAK2融合基因選自PCM1-JAK2E36/E9、PCM1-JAK2 E36/E7或PCM1-JAK2 E25/E9。

4.一種定量檢測樣本中PCM1-JAK2融合基因相對表達量的試劑盒，所述試劑盒包括檢測體系PCR反應液，其特征在于，所述檢測體系PCR反應液包括THUNDERBIRD Probe qPCRMix、檢測用上游引物PCM1-JAK2-E36/E9-F、PCM1-JAK2-E25/E9-F，下游引物PCM1-JAK2-E36/E9-R、PCM1-JAK2-E36/E7-R、PCM1-JAK2-E25/E9-R，探針PCM1-E36-Probe和PCM1-E25-Probe以及內(nèi)參基因Abl上游引物Abl-F、下游引物Abl-R和探針Abl-Probe，其中，

PCM1-JAK2-E36/E9-F：CCCTTTGCCGTTACGTTTACC

PCM1-JAK2-E25/E9-F：TACAACCTCAGTGGGACAAAGAA

PCM1-JAK2-E36/E9-R：TCCCACTCAGGTTGTACTCTTCA

PCM1-JAK2-E36/E7-R：TGATGTGCATCTGCAGTTAATCTATAA

PCM1-JAK2-E25/E9-R：GTGGACGAGATTCATTTTGTGAAATT

PCM1-E36-Probe：FAM-TCCTGAAAGCTCTCTGGCTGGAAGTCC-TAMRA

PCM1-E25-Probe：FAM-CTGGGAGTGATTTTTCCATGTTTGAAGCT-TAMRA

Abl-F：GATACGAAGGGAGGGTGTACCA

Abl-R：CTCGGCCAGGGTGTTGAA

Abl-Probe：FAM-GCTTCTGATGGCAAGCTCTACGTCTCCT-TAMRA。

5.如權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括紅細胞裂解液，所述紅細胞裂解液包括16μmol/L氯化銨、1mmol/L碳酸氫鉀和12.5μmol/L EDTA。