[發明專利]一種檢測樣本中目標IgM抗體的均相免疫檢測試劑盒及其使用方法和應用

有效

• 申請號: 201711069928.5
• 申請日: 2017-11-03
• 公開（公告）號: CN107976535B
• 公開（公告）日: 2020-03-20
• 發明（設計）人: 趙文雅;劉宇卉;李臨
• 申請（專利權）人: 科美診斷技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/68
• 代理公司: 北京聿宏知識產權代理有限公司 11372
• 代理人: 吳大建;桑勝梅

本發明涉及一種檢測樣本中目標IgM抗體的均相免疫檢測試劑盒及其使用方法和應用。該試劑盒包括試劑a，其包括已知抗原，所述已知抗原能夠與待檢樣本中的目標IgM抗體特異性結合形成第一復合物；試劑b，其包括補體C1q，所述補體C1q能夠與所述第一復合物特異性結合形成第二復合物，且所述補體C1q不能與游離的IgM抗體結合；其中，所述已知抗原和補體C1q中的任一種與受體相連；所述受體能夠與其接收到的單線態氧反應產生可檢測的化學發光信號；試劑c，其包括供體，所述供體能夠在激發狀態生成單線態氧。利用上述該試劑盒檢測樣本中目標IgM抗體的方法解決了非特異性IgM抗體對檢測的影響。

技術領域

本發明屬于生物醫學檢測技術領域，具體涉及一種檢測樣本中目標IgM抗體的均相免疫檢測試劑盒及其使用方法和應用。

背景技術

IgM類抗體的檢測在醫學檢驗中具有重要的意義。病原體初次感染機體，最先產生的抗體總是IgM抗體，隨著機體免疫應答的進程，發生抗體類別轉換，產生IgG、IgM或IgA抗體。因而，在感染性疾病的診斷中，IgM抗體檢測呈陽性是現癥感染的標志。

目前常用的IgM抗體檢測的方法有捕獲法，其是在固相載體上固相包被抗人IgM(μ鏈)抗體，血清/血漿樣本經過與固相載體反應后，樣本中的所有IgM抗體被捕獲到固相載體上，此時經過洗滌，可以去除特異性IgG抗體的干擾，加入標記的抗原，經反應產生可以檢測的信號。該方法存在以下兩個弊端：一是抗人IgM抗體作為捕獲抗體，無法區分特異性IgM抗體和非特異性IgM抗體，當特異性IgM抗體濃度較低而非特異性IgM抗體濃度特別高時，可能會存在特異性IgM抗體被洗滌而除去，造成假陰性的結果。二是檢測過程需經過兩步孵育和洗滌，在洗滌的過程中非常依賴洗滌設備的洗滌效率，容易出現重復性差等問題，兩次孵育步驟繁瑣，耗時長，降低了工作效率。

另外一種IgM抗體的檢測方法使用均相的一步法檢測，在檢測過程中加入去除特異性IgG干擾的生物活性物質，解決了捕獲法需要兩步洗滌效率低，耗時長的問題。但是該方法加入了一種新的生物活性物質，反應系統中存在過多的蛋白組分，有造成假陽性的可能。另外，均相反應系統中非特異性IgM抗體也會消耗大量的抗人IgM抗體，當特異性IgM抗體濃度較低而非特異性IgM抗體濃度特別高時，也有造成假陰性的可能。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足提供了一種檢測樣本中目標IgM抗體的試劑盒和方法。利用該試劑盒中含有的補體C1q代替抗人IgM抗體作為捕獲物或示蹤物，進而檢測目標IgM抗體的方法，由于非特異性IgM抗體不與已知抗原發生反應，呈游離狀態，因而不能與補體C1q結合，去除了非特異性IgM對檢測的干擾。

為此，本發明第一方面提供了一種檢測樣本中目標IgM抗體的均相免疫檢測試劑盒，其包括：

試劑a，其包括已知抗原，所述已知抗原能夠與待檢樣本中的目標IgM抗體特異性結合形成第一復合物；

試劑b，其包括補體C1q，所述補體C1q能夠與所述第一復合物特異性結合形成第二復合物，且所述補體C1q不能與游離的IgM抗體結合；

其中，所述已知抗原和補體C1q中的任一種與受體相連；所述受體能夠與其接收到的單線態氧反應產生可檢測的化學發光信號；

試劑c，其包括供體，所述供體能夠在激發狀態生成單線態氧。

在本發明的另一些實施方式中，所述試劑盒包括：

試劑a，其包括已知抗原，所述已知抗原能夠與待測樣本中的目標IgM抗體特異性結合形成第一復合物；

試劑b，其包括補體C1q，所述補體C1q能夠與所述第一復合物特異性結合形成第二復合物，且所述補體C1q不能與游離的IgM抗體結合；