[發明專利]一種CAR?Treg細胞的制備方法及其應用在審
| 申請號： | 201711066339.1 | 申請日： | 2017-11-02 |
| 公開（公告）號： | CN107557342A | 公開（公告）日： | 2018-01-09 |
| 發明（設計）人： | 李相魯;張嚴冬;李俊;謝海濤;李莉 | 申請（專利權）人： | 廣東萬海細胞生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N15/867;A61K35/17;A61P37/00 |
| 代理公司： | 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙)11548 | 代理人： | 李靜 |
| 地址： | 523000 廣東省東莞市松山*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 car treg 細胞 制備 方法 及其 應用 | ||
1.一種CAR-Treg 細胞的制備方法，其特征在于：將包含CAR 的病毒感染CD4+CD25+的Treg 細胞，得到上述CAR-Treg 細胞。
2.根據權利要求1 所述的一種CAR-Treg 細胞的制備方法，其特征在于，所述CD4+CD25+Treg 細胞采用以下方式制備：從外周血中分離得到外周單核細胞，然后從所述單核細胞中通過磁珠分選得到CD4+CD25+ Treg 細胞。
3.根據權利要求1 所述的一種CAR-Treg 細胞的制備方法，其特征在于，所述嵌合抗原受體包括依次串聯的胞外區肽段、跨膜區肽段和胞內結構域肽段，所述胞外區肽段為抗CD19，CD20，CD22，CD33，CD38，CD123 中的一種或幾種抗體或其抗原結合部分。
4.根據權利要求3 所述的一種CAR-Treg 細胞的制備方法，其特征在于：所述肽段為抗CD19，CD20，CD22，CD33，CD38，CD123 抗體或其抗原結合部分為全抗體、雙特異性抗體、scFv、Fab、Fab' 、F(ab')2 、Fv。
5.根據權利要求1 所述的一種CAR-Treg 細胞的制備方法，其特征在于：所述跨膜區肽段為CD8 跨膜區肽段，所述胞外區肽段與CD8 跨膜區肽段通過CD8 的鉸鏈區肽段相連。
6.根據權利要求1 所述的一種CAR-Treg 細胞的制備方法，其特征在于：所述胞內結構域肽段為共刺激信號分子，選自4-1BB、CD28、CD3ζ的胞內結構域肽段中的一種或多種。
7.根據權利要求1 所述的一種CAR-Treg 細胞的制備方法，其特征在于：所述嵌合抗原受體分子還包括信號肽。
8.根據權利要求2 所述的一種CAR-Treg 細胞的制備方法，其特征在于，制備得到的CD4+CD25+Treg 細胞還包括進一步培養的步驟；所述培養采用的培養基為GIBICO OpTmizer? CTS? T 細胞培養基。
9.根據權利要求2 所述的一種CAR-Treg 細胞的制備方法，其特征在于，制備得到的CD4+CD25+Treg 細胞采用CD3/28 磁珠活化。
10.將權利要求1 所述的CAR-Treg 細胞在制備治療自身免疫性疾病中的應用。
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