[發明專利]一種雌酚類半抗原、完全抗原及其制備方法

有效

• 申請號: 201711063768.3
• 申請日: 2017-11-02
• 公開（公告）號: CN107698441B
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發明（設計）人: 賈敏
• 申請（專利權）人: 山東師范大學
• 主分類號: C07C51/367
• 分類號: C07C51/367;C07C59/70;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;G01N33/74;G01N33/535
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

1.一種雌酚類半抗原的制備方法，其特征在于，所述方法包括：將雌酚類和一氯乙酸鈉在常溫、催化劑存在的條件下，于有機溶劑中進行反應，冰水終止反應，有機萃取劑萃取未反應的雌酚類，水相用酸酸化，生成白色沉淀，即得雌酚類半抗原；所述催化劑為氫氧化鉀或氫氧化鈉；

雌酚類為己烯雌酚、己烷雌酚或雙烯雌酚中的一種；

有機溶劑為二甲基亞砜、二氧六環、四氫呋喃或丙酮中的任意一種或兩種以上混合物；雌酚類、一氯乙酸鈉和催化劑的物質的量之比為1:0.5-1:15-25；雌酚類和一氯乙酸鈉的反應溫度為10-30℃，反應時間為10-35min；所述酸的濃度為1.5-2.5mol/L。

2.根據權利要求1所述雌酚類半抗原的制備方法，其特征在于，雌酚類與一氯乙酸鹽物質的量之比為1:1。

3.根據權利要求1所述雌酚類半抗原的制備方法，其特征在于，酸化所用酸為鹽酸、硫酸和硝酸中的一種或幾種。

4.根據權利要求1所述雌酚類半抗原的制備方法，其特征在于，有機萃取劑選自乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙醚中的一種或幾種混合。

5.根據權利要求1所述雌酚類半抗原的制備方法，其特征在于，雌酚類在有機溶劑中的濃度為0.183-0.275mol/L。

6.雌酚類完全抗原的制備方法，其特征在于，包括權利要求1-5中任一項所述的雌酚類半抗原的制備方法步驟，以及利用制備的半抗原進一步制備雌酚類完全抗原的步驟。

7.根據權利要求6所述雌酚類完全抗原的制備方法，其特征在于，所述利用制備的半抗原進一步制備雌酚類完全抗原的步驟為利用碳二亞胺法將雌酚類半抗原與載體蛋白偶聯，制備雌酚類完全抗原。

8.根據權利要求7所述雌酚類完全抗原的制備方法，其特征在于，所述利用制備的半抗原進一步制備雌酚類完全抗原的步驟為：雌酚類半抗原與1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺在二甲基亞砜中攪拌；將該溶液緩慢滴入含有載體蛋白的碳酸鹽緩沖液中，攪拌，透析，冷凍干燥后制成雌酚類完全抗原。

9.根據權利要求8所述雌酚類完全抗原的制備方法，其特征在于，雌酚類半抗原、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀酰亞胺和載體蛋白的質量比為1:0.4-0.6:0.7-0.9:0.6-10。

10.根據權利要求7所述雌酚類完全抗原的制備方法，其特征在于，載體蛋白選自牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、人血清白蛋白及多聚賴氨酸中的一種。

11.根據權利要求8所述雌酚類完全抗原的制備方法，其特征在于，雌酚類半抗原、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺加入二甲基亞砜后室溫下攪拌2小時，碳酸鹽緩沖液的pH為7.0，活化后的半抗原滴入后，室溫攪拌2小時。