[發明專利]miR?199a?5p的模擬物、抑制物及其重組表達載體與應用

在審

• 申請號: 201711062731.9
• 申請日: 2017-11-02
• 公開（公告）號: CN107841503A
• 公開（公告）日: 2018-03-27
• 發明（設計）人: 徐存拴;孟竺;張春艷
• 申請（專利權）人: 河南師范大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K48/00;A61K31/7088;A61P1/16
• 代理公司: 北京易正達專利代理有限公司11518
• 代理人: 趙白

1.一種miR-199a-5p的模擬物，其特征在于，所述模擬物為SEQ ID NO.1。

2.一種能抑制miR-199a-5p結合TNF-α的3′-UTR的抑制物，其特征在于，所述抑制物選自TNF-α的3′-UTR中長約700～1000bp區段；所述抑制物與miR-199a-5p的結合位點為CACTGGA。

3.如權利要求2所述的抑制物，其特征在于，所述抑制物為SEQ ID NO.2。

4.如權利要求2或3所述的抑制物，其特征在于，所述抑制物核苷酸序列的5′和3′末端分別添加限制性酶切位點；優選地，所述限制性酶切位點在酶切后產生粘性末端；更優選地，所述的限制性酶切位點分別為Xho I和Not I對應的核苷酸序列；所述Xho I酶切位點位于5′末端，所述Not I酶切位點位于3′末端。

5.一種重組表達載體，其特征在于，所述重組表達載體包含如權利要求2～4中任一項所述的能抑制miR-199a-5p結合TNF-α的3′-UTR的抑制物。

6.如權利要求5所述的重組表達載體，其特征在于，所述重組表達載體中的標記基因為雙熒光素報告酶。

7.如權利要求5或6所述的重組表達載體，其特征在于，所述重組表達載體是通過將如權利要求2或3所述的能抑制miR-199a-5p結合TNF-α的3′-UTR的抑制物連接到報告載體psi-CHECK-2中得到的。

8.如權利要求1所述的miR-199a-5p的模擬物和/或如權利要求2～4中任一項所述的能抑制miR-199a-5p結合TNF-α的3′-UTR的抑制物在制備用于促進肝再生的藥物中的應用。

9.如權利要求8所述的應用，其特征在于，所述促進肝再生的藥物為抑制細胞凋亡相關蛋白TNF表達和/或促進肝細胞增殖相關蛋白表達的藥物。