[發明專利]具有抑制腫瘤進程活性的融合蛋白BTN3A3-Ig及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201711062323.3
• 申請日: 2017-11-02
• 公開（公告）號: CN109748967B
• 公開（公告）日: 2022-03-22
• 發明（設計）人: 唐麗;柳迪;賀福初;陸倩
• 申請（專利權）人: 北京蛋白質組研究中心;中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;A61K38/17;A61P35/00
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322
• 代理人: 魯兵

本發明公開了一種具有抑制腫瘤進程活性的融合蛋白BTN3A3?Ig及其制備方法與應用。本發明通過阻斷LSECtin與細胞表達的BTN3A3之間的相互作用從而達到抑制腫瘤進程目的的融合蛋白，命名為BTN3A3?Ig，是將人BTN3A3與人IgG1通過連接肽連接后獲得的重組蛋白，能夠阻斷LSECtin與BTN3A3之間的相互作用，從而抑制腫瘤的發生與發展。本發明的融合蛋白BTN3A3?Ig為腫瘤的免疫蛋白治療提供了一個新的思路，應用前景廣闊。

技術領域

本發明屬于生物技術領域中的融合蛋白，特別是涉及一種具有抑制腫瘤進程活性的融合蛋白及其制備方法與應用。

背景技術

全球腫瘤發病率自20世紀70年代末開始一直呈上升趨勢。目前，對于腫瘤的治療手段主要包括手術、放療、化療、內分泌治療、靶向治療及中醫藥輔助治療等。困擾腫瘤治療的根本原因是腫瘤具備一定的耐藥性及復發能力。研究表明，導致腫瘤具有耐藥性以及復發能力的根本原因在于腫瘤細胞干性的維持與提升，因此，腫瘤細胞干性的靶向性治療日益成為研究的熱點。腫瘤細胞的干性受基因多樣性、表觀遺傳以及腫瘤微環境三個因素調控。鑒于腫瘤微環境因素促進腫瘤細胞干性依賴細胞間交互作用，因此，認識并挖掘促進腫瘤細胞干性的膜蛋白相互作用分子對，篩選抑制該類膜蛋白間相互作用的物質，有望為腫瘤細胞干性的靶向性治療提供新思路。

腫瘤相關巨噬細胞是腫瘤微環境中存在的巨噬細胞的總稱，是腫瘤微環境中浸潤免疫細胞的重要組成部分。已有研究顯示，腫瘤相關巨噬細胞能夠通過多種途徑促進腫瘤進程，包括抑制腫瘤免疫反應、促進腫瘤免疫耐受環境的形成、促進腫瘤組織血管生成等。鑒于腫瘤相關巨噬細胞促進腫瘤進程現象明確，清除腫瘤相關巨噬細胞、促使腫瘤相關巨噬細胞向免疫激活方向轉化已成為潛在的腫瘤治療方法。

LSECtin(Liver Sinusoidal Endothelial Cells lectin)是Ⅱ型跨膜糖蛋白，位于人類19p13.3，是C型凝集素家族的新成員。已知LSECtin蛋白功能包括在黑色素瘤中負調節T細胞免疫反應，促進埃博拉病毒引發的炎性反應，抑制CTL依賴的HBV病毒清除，促進結腸癌腫瘤細胞肝轉移，發明人賀福初、唐麗等之前發現LSECtin可能作為黑色素瘤免疫治療的靶點(CN104906575A，2014100898325)；治療和/或預防埃博拉病毒的靶點(CN107019703A，2016100731468)；抗丙型肝炎病毒感染藥物作用靶點(CN101152558，2007101755278)；還發現LSECtin或含有LSECtin的融合蛋白可應用于制備抑制癌細胞向肝轉移的藥物，LSECtin蛋白及其融合蛋白能粘附結腸癌細胞、抑制結腸癌細胞往肝臟的歸巢性遷移，成為抗粘附治療腫瘤肝轉移的一個新靶標(CN101732715A，2008102257147)。

發明內容

本發明提供了一種能夠阻斷LSECtin與BTN3A3之間的相互作用的融合蛋白，從而抑制腫瘤的發生與發展(抑制腫瘤進程)。

本發明所提供的具有抑制腫瘤進程活性的融合蛋白，命名為BTN3A3-Ig，是將人BTN3A3與人IgG1通過連接肽連接后獲得的重組蛋白。

具體來講，所述融合蛋白BTN3A3-Ig是下述氨基酸殘基序列之一：

1)序列表中的序列1；

2)將序列表中序列1的氨基酸殘基序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添加且具有抑制腫瘤進程活性的蛋白質；

3)將序列表中序列1的氨基酸殘基序列經過氨基酸殘基的取代、缺失或添加且具有抑制腫瘤進程活性的蛋白質，新蛋白質與序列1同源性達到80％或更高。

其中：序列表中的序列1由490個氨基酸殘基組成，自氨基(N)端第1位為起始密碼子，自氨基端第2-15位為信號肽，自氨基端第16-262位為人BTN3A3，自氨基端第263-266位為連接肽(linker)，自氨基端第267-490位為人IgG1。