[發明專利]一種檢測奧扎格雷鈉原料藥中溴代丁二酰亞胺和丁二酰亞胺含量的方法

在審

• 申請號: 201711060031.6
• 申請日: 2017-11-01
• 公開（公告）號: CN107643351A
• 公開（公告）日: 2018-01-30
• 發明（設計）人: 斯衛東;程紹紅;王強;張春景
• 申請（專利權）人: 浙江科瑞醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司33224
• 代理人: 沈自軍

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，尤其涉及一種檢測奧扎格雷鈉原料藥中溴代丁二酰亞胺和丁二酰亞胺含量的方法。

背景技術

奧扎格雷鈉(sodium ozagrel)，化學名為反式-3-[4-(1H-咪唑-1-甲基) 苯基]-2-丙烯酸鈉，是日本小野藥品工業株式會社于1989年以商品名 Cataclot投放市場的首個血栓素合成酶抑制劑；其能阻礙前列腺素(PGH₂) 生成血栓素(TXA₂)，促使血小板所衍生的PGH₂轉向內皮細胞，內皮細胞用以合成PGI₂，從而改善TXA₂與前列腺素PGI₂的平衡異常。奧扎格雷鈉具有抑制血小板的聚集和擴張血管的作用。在臨床上，奧扎格雷納主要用于治療急性血栓性腦梗死和腦梗死所伴隨的運動障礙。

目前，關于原料藥奧扎格雷鈉的合成工藝路線有多種，其中最常用的是將甲基肉桂酸酯類溴化得到對溴甲基肉桂酸酯類，對溴甲基肉桂酸酯類與咪唑反應得到奧扎格雷酯類，堿性水解后得到奧扎格雷鈉。

例如：申請公布號為CN102558061A的發明專利申請公開了一種奧扎格雷的合成方法，該方法將對甲基肉桂酸乙酯與N-溴代丁二酰亞胺反應得到對溴甲基肉桂酸乙酯；對溴甲基肉桂酸乙酯與咪唑反應得到奧扎格雷乙酯；奧扎格雷乙酯水解得到奧扎格雷粗品，經復合溶劑精制得到奧扎格雷。該發明方法制備獲得的奧扎格雷純度達99.8％以上，單個雜質小于0.1％，總雜質小于0.2％。

上述合成工藝因添加了N-溴代丁二酰亞胺，使得產品奧扎格雷中含有溴代丁二酰亞胺和丁二酰亞胺兩種雜質，而上述雜質如果在后續的處理過程中不能有效去除，就會殘留在中間體咪唑甲基肉桂酸酯中，進而影響原料藥和藥品奧扎格雷鈉注射液的品質。然而，一方面由于N-溴代丁二酰亞胺極不穩定，導致檢測誤差較大；另一方面，目前本領域中并沒有用于檢測上述合成工藝獲得的奧扎格雷/奧扎格雷鈉原料藥中溴代丁二酰亞胺和丁二酰亞胺雜質的方法。

因此，有必要提供一種檢測奧扎格雷鈉原料藥中溴代丁二酰亞胺和丁二酰亞胺含量的方法，以保證原料藥和藥品的質量。

發明內容

本發明公開了一種檢測奧扎格雷鈉原料藥中溴代丁二酰亞胺和丁二酰亞胺含量的方法，該方法能夠準確、有效地檢測出奧扎格雷鈉原料藥中溴代丁二酰亞胺和丁二酰亞胺的總含量，確保奧扎格雷鈉原料藥的品質。

一種檢測奧扎格雷鈉原料藥中溴代丁二酰亞胺和丁二酰亞胺含量的方法，包括：

(1)取待測的奧扎格雷鈉樣品，加鹽酸水溶液溶解后，得到供試品溶液；

(2)以經過鹽酸水溶液溶解的丁二酰亞胺標準品作為對照品溶液，利用高效液相色譜技術檢測供試品溶液中的丁二酰亞胺，獲得奧扎格雷鈉原料藥中溴代丁二酰亞胺和丁二酰亞胺的總含量。

N-溴代丁二酰亞胺為奧扎格雷鈉溴化起始物料，而丁二酰亞胺為N- 溴代丁二酰亞胺反應產物，二者均具有一定毒性，由于二者均為親水化合物和極性化合物，在常規C18柱中的保留能力很弱甚至根本不能保留；而CAPCELL PAK C18 AQ(250mm×4.6mm，5μm)色譜柱對于上述親水性和極性化合物具有更強的保留能力和選擇性。

為保證檢測的準確性，本發明一方面向奧扎格雷鈉樣品中加入的0.05 mol/L鹽酸水溶液，將奧扎格雷鈉樣品中的N-溴代丁二酰亞胺完全轉化為穩定的丁二酰亞胺，利用CAPCELL PAK C18 AQ(250mm×4.6mm，5μm) 色譜柱進行高效液相層析，以外標法對奧扎格雷鈉樣品中的丁二酰亞胺進行準確定量，從而有效的檢出目的產物中N-溴代丁二酰亞胺和丁二酰亞胺殘留量，以更好地控制藥品的質量；另一方面通過梯度洗脫的方法，沖洗出色譜柱中殘留的奧扎格雷鈉，保證了色譜柱的正常使用。

作為優選，所述鹽酸水溶液中鹽酸的濃度為0.05mol/L，奧扎格雷鈉樣品與鹽酸水溶液的用量比為1mg:1ml。

由于奧扎格雷鈉在過酸的條件下會析出奧扎格雷，增加了檢驗的難度，0.05mol/L鹽酸水溶液的使用，使得奧扎格雷鈉樣品中的N-溴代丁二酰亞胺能100％的轉化成丁二酰亞胺，且對奧扎格雷鈉樣品不產生影響。

作為優選，所述高效液相色譜的條件為：以CAPCELL PAK C18 AQ 250mm×4.6mm 5μm色譜柱為填充劑；流動相A為0.02mol/L的磷酸二氫鉀，流動相B為甲醇，流速為0.7ml/min，洗脫程序為線性梯度洗脫；柱溫為30℃，檢測波長為200nm。