[發(fā)明專利]一種促紅細胞生成素來源肽及其制備方法和用途

有效

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• 申請日: 2017-11-01
• 公開（公告）號: CN107880109B
• 公開（公告）日: 2019-08-30
• 發(fā)明（設計）人: 汪昕;丁晶;吳婷婷
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬中山醫(yī)院
• 主分類號: C07K14/505
• 分類號: C07K14/505;C07K1/04;A61K38/18;A61P25/00;A61P25/08
• 代理公司: 上海容慧專利代理事務所(普通合伙) 31287
• 代理人: 于曉菁

技術領域

本發(fā)明屬于生物基因領域，涉及一種促紅細胞生成素，具體來說是一種促紅細胞生成素來源肽及其制備方法和用途。

背景技術

隨著人類壽命的延長，神經(jīng)系統(tǒng)疾病正越來越成為患者、家人和社會的沉重負擔。2016年《柳葉刀》雜志發(fā)表了國際疾病負擔組(GBD)新的全球死因分析報告，2015年腦血管病死因順位再次上升，躍升為人類死因的第二位。而在我國，腦血管疾病是我國人口首位的死亡原因和致殘原因，其患病率逐年上升，并有年輕化的趨勢。而阿爾茲海默病、其他類型癡呆、癲癇、帕金森病等其它神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)病率也是逐年上升，其死亡人數(shù)從1990年到2015年增長率超過20％。除了影響健康，以腦血管疾病為代表的神經(jīng)系統(tǒng)疾病給國家和社會造成了一定的經(jīng)濟負擔，WHO計算得出，減少10％的卒中和心肌梗死所致的死亡率，預計每年會減少用于干預措施的約250億美元的經(jīng)濟支出。從某種意義上說，神經(jīng)系統(tǒng)疾病不僅是醫(yī)學問題，也是社會問題。

神經(jīng)系統(tǒng)疾病由于發(fā)病機制復雜，癥狀繁多，仍有不少尚缺乏有效的藥物治療。比如缺氧性腦病，高壓氧艙可以改善腦組織供氧，但禁用于控制不佳的高血壓患者和危重患者，且可能產(chǎn)生腦血管繼發(fā)性收縮而引起的不良作用，臨床應用受到限制。再比如缺血性卒中，腦缺血后發(fā)生能量代謝障礙、興奮性氨基酸毒性作用等一系列病理生理改變，溶栓是目前唯一有效的方法，但溶栓治療時間窗較短，只有少數(shù)患者受益。另一方向則是神經(jīng)保護治療，阻斷神經(jīng)細胞的死亡，挽救缺血半暗帶的神經(jīng)細胞。目前可能具有保護作用的主要神經(jīng)保護劑有：谷氨酸拮抗劑、抗炎因子、鈣離子通道阻斷劑、鈉離子通道阻斷劑、鉀離子通道激活劑、自由基清除劑、GABA受體拮抗劑、5-羥色胺拮抗體、NMDA受體拮抗劑、低溫苯巴比妥類藥物誘導麻醉等。當前有超過1000多個神經(jīng)保護劑，在動物實驗中有效，超過100種藥物進行了臨床試驗，然而在臨床上卻收效甚微。因此研制和開發(fā)在新的有效的神經(jīng)保護劑有重要意義。

促紅細胞生成素(EPO)是主要由腎臟產(chǎn)生的由165個氨基酸組成的34kDa的糖蛋白激素，是最早應用于臨床的細胞因子。以往促紅細胞生成素在臨床被廣泛應用于治療貧血，近年來研究發(fā)現(xiàn)，EPO及EPO受體(EPOR)還廣泛分布于各種非造血組織，包括神經(jīng)、心臟、腎臟等，是一種多功能分子，具有廣泛的組織保護活性。特別地，近20年來的研究發(fā)現(xiàn)，無論在體內或體外實驗，EPO均可起到神經(jīng)保護和神經(jīng)營養(yǎng)作用。

在神經(jīng)系統(tǒng)，EPO/EPOR表達在神經(jīng)元、星形膠質細胞、血管內皮細胞等，在正常成人腦組織內EPO/EPOR呈低表達狀態(tài)，但當受到損傷或缺血、缺氧等應激時其表達顯著增加。但激活的EPO/EPOR系統(tǒng)尚不足以保護受損的神經(jīng)細胞，而若外源性補充大量重組促紅細胞生成素(rhEPO)，通過細胞膜上的受體介導的胞吞或胞飲作用透過血腦屏障進入神經(jīng)系統(tǒng)，EPO與過度表達的EPOR結合后誘導Jak2磷酸化，激活信號轉導子及轉錄激活子STAT5通路、磷脂酰肌醇3激酶(P13K)/AKT通路、核因子NF-κB等多個通路，通過抗炎、抗氧化應激、抗凋亡、抑制興奮性毒性、促進神經(jīng)再成、保護血腦屏障等多種機制聯(lián)合作用，減少神經(jīng)細胞的凋亡，減輕神經(jīng)元的損傷，發(fā)揮神經(jīng)保護作用。并且，EPO的神經(jīng)保護作用已在多種動物疾病模型中證實，包括：腦缺血、腦缺血缺氧性損傷、腦缺血再灌注損傷、脊髓損傷、實驗性自身免疫性腦脊髓膜炎(EAE)、蛛網(wǎng)膜下腔出血、癲癇、帕金森、多系統(tǒng)萎縮、坐骨神經(jīng)壓迫、視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)損傷等。

隨著EPO在體內外實驗均被證實具有神經(jīng)保護作用后，最近十幾年，一系列的臨床試驗進一步研究EPO是否在人體內可以發(fā)揮神經(jīng)保護及再生的功能，從腦缺血、神經(jīng)損傷到炎癥及神經(jīng)退行性變患者，比較欣慰的是，這些研究大多證實了EPO的治療是有效的。但大劑量或長期使用EPO，由于其具有促進紅細胞生成的作用，會直接導致紅細胞增多癥、高血壓、血栓形成等一系列嚴重的醫(yī)學問題，因此，研發(fā)無造血功能但具有神經(jīng)保護功效的EPO衍生物、變構體等制劑，成為目前神經(jīng)科學家研究的熱點。