[發明專利]預測腫瘤壞死因子抑制劑療效的試劑和方法

有效

• 申請號: 201711057457.6
• 申請日: 2017-11-01
• 公開（公告）號: CN107817353B
• 公開（公告）日: 2020-10-13
• 發明（設計）人: 王久存;劉晶;鄒和建;任士芳;顧建新;牛振民;金力;李媛;馬彥云;杜愛平
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N27/62;G01N30/02;G01N24/08
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 韋東

1.試劑和/或儀器在制備用于預測使用腫瘤壞死因子抑制劑治療強直性脊柱炎患者療效的產品中的應用，其中，所述試劑和/或儀器包括用于測定血液IgG表面雙天線復雜型N糖鏈的末端半乳糖基化水平的試劑和/或儀器，其中，所述末端半乳糖基化水平為IgG表面末端無半乳糖連接的雙天線復雜型N-糖鏈水平Gal0、末端連有1個半乳糖的雙天線復雜型N-糖鏈水平Gal1和末端連有2個半乳糖的雙天線復雜型N-糖鏈水平Gal2；

所述腫瘤壞死因子抑制劑為融合蛋白類藥物；

所述產品還包括以下模塊和/或處理器：

用于計算Gal0與Gal1和Gal2的豐度比值Gal比的模塊和/或處理器；

用于存儲計算所得的Gal比的模塊和/或處理器；

用于將所述Gal比與閾值對比以預測使用腫瘤壞死因子抑制劑治療強直性脊柱炎患者療效的模塊和/或處理器；和

用于提供預測結果的模塊和/或處理器；

所述Gal0與Gal1和Gal2的豐度比值的計算采用選自下組的公式進行：

Gal比值＝Gal0/(Gal1+Gal2)；

Gal比值＝Gal0/(Gal1+2Gal2)；或

其倒數、對數等其他變換形式；

所述閾值的計算方法選自：

方法1：選定ROC曲線中斜率最大點，取其對應的Gal比為閾值；

方法2：最大化靈敏度和特異度的值，即〔靈敏度％-(1-特異度％)〕max對應的Gal比即為閾值。

2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述用于測定血液IgG表面雙天線復雜型N糖鏈的末端半乳糖基化水平的試劑和/或儀器包括在以下一種或多種方法中用到的試劑和/或儀器：基質輔助激光解析飛行時間質譜法、快原子轟擊質譜和電噴霧質譜；液相色譜法；液相色譜一質譜聯用法；糖芯片技術；和核磁共振NMR。

3.如權利要求1或2所述的應用，其特征在于，所述產品還包括選自下組的一種或多種試劑和/或儀器；

a)用于采集和/或處理對象血液樣品的試劑和/或儀器；

b)用于分離和/或純化血清/血漿IgG的試劑和/或儀器；和

c)用于分離、純化和/或富集血清IgG表面N-糖鏈的試劑和/或儀器。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述用于分離和/或純化血清/血漿IgG的試劑和/或儀器為在使用下述任一種方法分離IgG時使用到的試劑和儀器：IgG純化柱、鹽析法、有機溶劑沉淀法、聚乙二醇置換法、液相層析和親合層析。

5.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述用于分離、純化和/或富集血清IgG表面N-糖鏈的試劑和/或儀器為采用酶法和化學法從IgG上分離N糖鏈時使用到的試劑和儀器；酶法中使用到的試劑包括糖苷酶：糖苷酶PNGase F，化學法中使用到的試劑包括糖蛋白肼解試劑；

所述用于分離、純化和/或富集血清IgG表面N-糖鏈的試劑和/或儀器還包括從IgG上分離N糖鏈后對N糖鏈進行分離和/或純化的試劑和/或儀器；所述對N糖鏈進行分離和/或純化的試劑和/或儀器包括在下述任一方法中使用到的試劑和/或儀器：多孔石墨化碳PGC固相萃取法、多糖純化柱、凝集素親合法、毛細管電泳和高效液相色譜。