[發(fā)明專利]測(cè)定丹參多糖水解產(chǎn)物-半乳糖醛酸的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711056624.5
• 申請(qǐng)日: 2017-11-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107966502B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張濤;羅軼;何頌華;白桂昌;呂軼峰;羅永強(qiáng);朱雪妍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/74
• 代理公司: 南寧市來(lái)來(lái)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 45118
• 代理人: 來(lái)光業(yè)

1.測(cè)定復(fù)方丹參片中丹參多糖水解產(chǎn)物-半乳糖醛酸的方法，其特征在于，該方法在復(fù)方丹參片中丹參是否按照標(biāo)準(zhǔn)工藝生產(chǎn)的檢驗(yàn)中應(yīng)用，所述方法如下：

（1）收集復(fù)方丹參片樣品；

（2）色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm；理論板數(shù)按半乳糖醛酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000；所述乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液中乙腈和0.05mol/L磷酸二氫鉀的配比為18﹕82，用40%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.9；

（3）校正因子測(cè)定：取鹽酸氨基葡萄糖適量，精密稱定，加水制成每1mL含1mg的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液；另取半乳糖醛酸對(duì)照品約10mg，置20mL量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，精密吸取2mL，置10mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1mL，加水稀釋至刻度，搖勻，吸取400μL，加0.5mol/L的1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮甲醇溶液與0.3mol/L的氫氧化鈉溶液各400μL，混勻，70℃水浴反應(yīng)100分鐘；再加0 .3mol/L鹽酸溶液500μL，混勻，用三氯甲烷洗滌3次，每次2mL，棄去三氯甲烷液，水層加酚酞指示液1滴，用0.3mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至中性，離心，精密吸取0.7mL，精密加入pH為12的磷酸鹽緩沖溶液0.7mL，混勻，吸取20μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算校正因子；

（4）供試品溶液的制備：取樣品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取相當(dāng)于5片的量，精密稱定，精密加水20mL，超聲處理1小時(shí)，超聲條件：功率600W，頻率46kHz；離心5分鐘，精密吸取上清液5mL，加無(wú)水乙醇5mL，搖勻，4℃放置1小時(shí)，離心，棄去上清液，沉淀加50%乙醇洗滌3次，每次2mL，離心10分鐘，棄去上清液，沉淀加內(nèi)標(biāo)溶液1mL，加水使溶解，轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻；吸取1mL，置頂空瓶中，加3.0mol/L的鹽酸溶液0.5mL，封口，混勻，110℃水解2小時(shí)，放冷，用3.0mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至中性；

（5）考察被測(cè)溶液的穩(wěn)定性、半乳糖醛酸進(jìn)樣量與峰面積比值的線性關(guān)系，并進(jìn)行準(zhǔn)確度、精密度和重現(xiàn)性試驗(yàn)；

（6）測(cè)定：吸取供試品溶液400μL，加0.5mol/L的1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮甲醇溶液與0.3mol/L的氫氧化鈉溶液各400μL，混勻，70℃水浴反應(yīng)100分鐘；再加0.3mol/L鹽酸溶液500μL，混勻，用三氯甲烷洗滌3次，每次2mL，棄去三氯甲烷液，水層加酚酞指示液1滴，用0.3mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至中性，離心，精密吸取0.7mL，精密加入pH為12的磷酸鹽緩沖溶液0 .7mL，混勻，吸取20μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，得到結(jié)果。

2.權(quán)利要求1所述的測(cè)定復(fù)方丹參片中丹參多糖水解產(chǎn)物-半乳糖醛酸的方法，其特征在于，還包括復(fù)方丹參片耐用性試驗(yàn)：分別采用不同品牌的色譜柱和色譜儀進(jìn)行考察。