[發明專利]一種發狀念珠藻的培養方法

有效

• 申請號: 201711056370.7
• 申請日: 2017-11-01
• 公開（公告）號: CN107629984B
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 曲樹杰;黃超;朱愛國;李文剛;尤升波;于金慧;馬德源;畢玉平
• 申請（專利權）人: 山東省農業科學院試驗基地服務中心;山東省農業科學院生物技術研究中心
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 孔娟

1.一種發狀念珠藻的培養方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）使用平板分離法對野外采集的發狀念珠藻經分離純化，得到藻種；

（2）將所述藻種接種于液體培養基中，在光照培養箱中培養得到接種藻體，其中，所述液體培養基包括BG11培養基；

（3）將所述接種藻體接種到固體培養基中，在室外定期補充水分保持固體培養基濕潤，培養得到移植藻體，所述固體培養基中包括以下質量份數的原料：腐殖酸土100-150份、硅酸鹽分子篩1-5份、藻酸鹽0.2-0.7份、K₂HPO₄ 1-5份、檸檬酸鐵銨0.5-1份、脂肪醇0.5-1份和水500-800份；

（4）將所述移植藻體連同所述固體培養基轉移到土壤中，定期澆水，培養即可得到成片的發狀念珠藻；

所述液體培養基包括以下質量份數的原料：BG11培養基 70-90份、5-氨基乙酰丙酸0.05-0.1份和肌醇0.1-0.5份。

2.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于，步驟（3）中，所述固體培養基還包括以下質量份數的原料：谷氨酰胺0.1-0.5份。

3.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于，步驟（1）包括：

（1）將野外采集的發狀念珠藻稀釋，得到稀釋藻液；

（2）將所述稀釋藻液噴射在平板培養基上進行擴大培養，在室溫、光照強度50-80μmol/（m²·s¹）及光暗周期10/14下，擴大培養8-12天所得到的發狀念珠藻細胞培養物作為藻種。

4.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于，步驟（2）中，所述藻種的培養條件是：室溫、光照強度30-50μmol/（m²·s¹）和光暗周期12/12；

所述藻種在培養過程中，根據液體培養基的消耗，及時補充，并調整液體培養基的pH維持在6.5-7.5。

5.根據權利要求2所述的培養方法，其特征在于，步驟（2）中，所述液體培養基中各原料的質量份數為：BG11培養基 80份、5-氨基乙酰丙酸0.08份和肌醇0.3份。

6.根據權利要求3所述的培養方法，其特征在于，所述固體培養基中各原料的質量份數為：腐殖酸土120份、硅酸鹽分子篩3份、藻酸鹽0.5份、K₂HPO₄ 2份、檸檬酸鐵銨0.8份、脂肪醇0.7份、谷氨酰胺0.2份和水600份。