[發(fā)明專利]一種透明質(zhì)酸的生物發(fā)酵生產(chǎn)工藝

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711052093.2
• 申請日: 2017-10-31
• 公開（公告）號: CN107586810A
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃明良;王鐸學(xué);吳暉暉;楊廷敏;徐大勇;蒲小平
• 申請（專利權(quán)）人: 成都遠(yuǎn)泓生物科技有限公司
• 主分類號: C12P19/26
• 分類號: C12P19/26
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司51214
• 代理人: 吳彥峰

1.一種透明質(zhì)酸的生物發(fā)酵生產(chǎn)工藝，其特征在于，其包括：

菌種活化：將菌種接種于斜面菌種培養(yǎng)基上活化得到活化菌種；

種子液制備：將活化菌種接種于種子培養(yǎng)基培養(yǎng)得到種子液；

擴大培養(yǎng)：將種子液接種于擴大培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)得到擴大培養(yǎng)液；

發(fā)酵培養(yǎng)：將擴大培養(yǎng)液接種至裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)分為發(fā)酵前期和發(fā)酵后期；發(fā)酵前期持續(xù)4-6h，溫度為35-37℃，發(fā)酵后期持續(xù)16-24h，溫度為28-32℃；發(fā)酵培養(yǎng)過程中，保持pH 7.0-7.5。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的透明質(zhì)酸的生物發(fā)酵生產(chǎn)工藝，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)基的成分及含量分別為:葡萄糖35-40g/L，蔗糖5-10g/L，酵母粉10-12g/L，尿素5-8g/L，蛋白胨5-8g/L，K₂HPO₄ 2.0-2.4g/L，MgSO₄?7H₂O 0.5-1.0g/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的透明質(zhì)酸的生物發(fā)酵生產(chǎn)工藝，其特征在于，種子培養(yǎng)基和擴大培養(yǎng)基的成分及含量與發(fā)酵培養(yǎng)基一致。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的透明質(zhì)酸的生物發(fā)酵生產(chǎn)工藝，其特征在于，從進入發(fā)酵后期開始，每隔4-6h添加一次發(fā)酵培養(yǎng)基，共添加四次；四次添加的發(fā)酵培養(yǎng)基的體積之比依次為1：2：4：8，且添加總體積等于原始的發(fā)酵培養(yǎng)基的體積。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的透明質(zhì)酸的生物發(fā)酵生產(chǎn)工藝，其特征在于，在所述發(fā)酵后期，向發(fā)酵液中加入吐溫80溶解于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2-4%稀堿中的溶液，至吐溫80在發(fā)酵液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.04-0.06%。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的透明質(zhì)酸的生物發(fā)酵生產(chǎn)工藝，其特征在于，在所述發(fā)酵后期，向發(fā)酵液中加入尿嘧啶核苷酸，至其在發(fā)酵培養(yǎng)基中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.08-0.1%。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的透明質(zhì)酸的生物發(fā)酵生產(chǎn)工藝，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)過程保持4-8L/min的通氣速率，并且發(fā)酵前期的攪拌速率為180-220r/min，發(fā)酵后期的攪拌速率為250-350r/min。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的透明質(zhì)酸的生物發(fā)酵生產(chǎn)工藝，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)過程中，接種的擴大培養(yǎng)液與發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為1:5-8。