[發明專利]一種吡蟲啉半抗原、完全抗原及制備方法和應用

有效

• 申請號: 201711044873.2
• 申請日: 2017-10-31
• 公開（公告）號: CN107805241B
• 公開（公告）日: 2020-05-26
• 發明（設計）人: 王保民;陳俊玉;王冕;譚桂玉;劉偉華
• 申請（專利權）人: 福建安欣睿捷生物科技有限公司
• 主分類號: C07D401/06
• 分類號: C07D401/06;C07K14/765;C07K1/107;G01N33/535
• 代理公司: 福州君誠知識產權代理有限公司 35211
• 代理人: 戴雨君

1.一種吡蟲啉完全抗原的制備方法，其特征在于：所述吡蟲啉完全抗原由吡蟲啉半抗原制備而成，包括以下步驟：

所述吡蟲啉半抗原的分子結構為：

所述吡蟲啉完全抗原的分子結構為：

所述吡蟲啉半抗原的制備方法，包括以下步驟：

1)將1份6-甲基煙酸溶解在3-4份甲醇中，加入0.1-0.2份濃硫酸，反應體系65-70℃加熱回流3～4小時，減壓蒸餾除去甲醇，得到6-甲基煙酸甲脂；

2)將1份上述6-甲基煙酸甲脂溶于3-4份四氯化碳中，接著加入1.2-1.5份N-溴代琥珀酰亞胺，待反應體系升溫到80℃，加入0.1-0.2份的偶氮二異丁腈或過氧苯甲酰，反應體系70-80℃反應3～4小時，減壓蒸餾除去四氯化碳得到液體，該液體用柱色譜純化得到固體，該固體為6-(溴甲基)煙酸甲酯；

3)將1份上述6-(溴甲基)煙酸甲酯溶于3.5-4份乙腈中，加入1-1.2份N-(咪唑烷-2-亞基)硝酰胺和3-3.5份碳酸鉀，反應體系70-80℃反應5-6小時后冷卻并抽濾，濾液濃縮后用柱色譜分離純化得到中間產物，該中間產物為6-((2-(硝基亞氨基)咪唑烷-1-基)甲基)煙酸甲酯；

4)將1份上述6-((2-(硝基亞氨基)咪唑烷-1-基)甲基)煙酸甲酯溶于3.5-4份甲醇中，加入2份NaOH水溶液，反應體系反應2-2.5小時，接著調節反應體系pH到中性，抽濾收集固體，該固體為所述吡蟲啉半抗原；

所述吡蟲啉完全抗原的制備方法，包括以下步驟：

1)將吡蟲啉半抗原溶于二甲基甲酰胺中，加入二環己基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺，室溫攪拌18-24小時得到A液；

其中，吡蟲啉半抗原、二甲基甲酰胺、二環己基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺的用量比為20μmol∶1mL∶60μmol∶60μmol；

2)將載體蛋白溶于碳酸鹽緩沖液中，得到B液；其中，載體蛋白和碳酸鹽緩沖液的用量比為0.4μmol∶3mL；

3)將上述A液滴加到B液中并于4℃攪拌10-12小時，得到C液；

4)將C液置于透析袋并于磷酸緩沖液中透析，每3小時換液一次，共透析6次，收集透析袋中的溶液，即為吡蟲啉完全抗原。

2.根據權利要求1所述的一種吡蟲啉完全抗原的制備方法，其特征在于：所述吡蟲啉半抗原的制備方法的步驟4)采用濃鹽酸調節pH。

3.根據權利要求1所述的一種吡蟲啉完全抗原的制備方法，其特征在于：所述載體蛋白為牛血清蛋白。

4.根據權利要求1所述的制備方法得到的吡蟲啉完全抗原的應用，其特征在于：所述吡蟲啉完全抗原應用于食品中吡蟲啉的檢測。