[發明專利]一種含生長抑素十四肽的PLGA緩釋微球的制備方法及在魚類緩釋埋植中的應用

在審

• 申請號: 201711031494.X
• 申請日: 2017-10-27
• 公開（公告）號: CN107737118A
• 公開（公告）日: 2018-02-27
• 發明（設計）人: 李文笙;張亞洲
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: A61K9/52
• 分類號: A61K9/52;A61K9/50;A61K38/12;A61K47/34;A61P3/00
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司44102
• 代理人: 單香杰

技術領域

本發明涉及一種PLGA緩釋微球的制備方法，具體地，涉及一種含生長抑素十四肽的PLGA緩釋微球的制備方法及在魚類緩釋埋植中的應用。。

背景技術

生長抑素十四肽最初是1973年在綿羊的下丘腦中被分離得到，隨著研究的深入，發現從魚類到哺乳動物均有生長抑素及其受體的分布，并且整個中樞神經系統以及大多數外周組織均可分泌生長抑素。生長抑素十四肽參與了多種生理功能，其最重要的功能室抑制生長激素的釋放，除此之外在哺乳動物中生長抑素十四肽能夠抑制垂體中其他激素的釋放，還能夠抑制胰多肽和胃腸肽的分泌。此外，生長抑素十四肽具有抗增殖的功能（細胞生長阻滯/細胞凋亡）、抑制胃排空、腸蠕動、膽囊收縮和腸對葡萄糖、氨基酸、甘油以及鈣離子等吸收?？傊?，生長抑素十四肽可以作為一種神經激素、神經遞質、神經調控子或者局部因子通過自分泌或者旁分泌的方式發揮其生理功能。魚類生長抑素十四肽的功能研究主要集中在與發育和代謝相關的胰腺激素的調控，生長抑素十四肽可以通過抑制INS分泌來間接調控糖脂代謝，也可以直接作用于糖脂代謝的關鍵酶。

乳酸-乙醇酸共聚物（poly（lactic-co-glycolic acid），PLGA）由兩個單體——乳酸和羥基乙酸隨機聚合而成，是一種可降解的高分子材料，由于其優異的生物相容性和可控的生物降解性，已被歐美藥監局所批準用于緩釋藥物的制作。

尚無利用PLGA在魚體內對生長抑素十四肽及其他藥物緩釋釋放的研究報導。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術的不足，提供一種含生長抑素十四肽的PLGA緩釋微球的制備方法。

本發明的進一步目的是提一種所述的制備方法得到的含生長抑素十四肽的PLGA緩釋微球在魚類緩釋埋植中的應用。

為了實現上述目的，本發明是通過以下技術方案予以實現的：

一種含生長抑素十四肽的PLGA緩釋微球的制備方法，制備步驟為：

S1. 用雙蒸水溶解生長抑素十四肽作為內水相；

S2. 用8～12%（w/v） 的PLGA二氯甲烷溶液作為中間油相；

S3. 將中間油相與內水相混合，乳化，制成W/O初乳；

S4. 初乳滴加到外水相1.8～2.2%（w/v）的PVA水溶液中，攪拌，得到W/O/W復乳；

S5. 將W/O/W復乳立即用溶劑揮發法去除二氯甲烷，離心收集微球，洗滌，干燥，得到微球；

其中，內水相：中間油相：外水相的體積比為1: 20～30: 750。

優選地，步驟S2中PLGA二氯甲烷溶液的濃度為10%（w/v）。

優選地，步驟S4中PVA水溶液的濃度為2%（w/v）。

優選地，內水相：中間油相：外水相的體積比為1:25:750。

本發明通過控制中間油相PLGA二氯甲烷溶液和外水相PVA水溶液的濃度以及內水相：中間油相：外水相的體積，使得制備得到的生長抑素十四肽的PLGA緩釋微球包封率高，粒徑小。

優選地，步驟S1中雙蒸水溶解生長抑素十四肽的濃度為1.25%（w/v）。

優選地，步驟S3中超聲乳化2min，100W，每5s停止5s。

優選地，步驟S4中1000rpm攪拌2 min。

優選地，步驟S5中所述溶劑揮發法為用蒸餾水稀釋，400rpm攪拌4小時。

優選地，步驟S5中蒸餾水洗三次，冷凍干燥24h。

優選地，PLGA中乳酸與乙醇酸的質量百分比為50:50，分子量為34kD，粘度為0.2dl/g。

最優選地，含生長抑素十四肽的PLGA緩釋微球的制備步驟為：

S1. 用雙蒸水溶解生長抑素十四肽作為內水相，濃度為1.25%（w/v）；

S2. 用10%（w/v）的PLGA二氯甲烷溶液作為中間油相，PLGA中乳酸與乙醇酸的質量百分比為50:50，分子量為34kD，粘度為0.2dl/g；

S3. 將中間油相與內水相混合，冰浴條件下超聲乳化2min，100W，每5s停止5s，制成W/O初乳；

S4. 將W/O初乳滴加到外水相2%（w/v）的PVA水溶液中，1000rpm攪拌2 min，得到W/O/W復乳；

S5. 將W/O/W復乳立即用蒸餾水稀釋，400rpm攪拌4小時揮發法去除二氯甲烷，離心收集微球，蒸餾水洗三次，冷凍干燥24h，得到微球；

其中，內水相：中間油相：外水相的體積比為1:25:750。