[發明專利]一種在單分子水平同時檢測多種DNA糖基化酶的熒光化學傳感器及其檢測方法和應用

有效

• 申請號: 201711027692.9
• 申請日: 2017-10-27
• 公開（公告）號: CN107723338B
• 公開（公告）日: 2020-03-27
• 發明（設計）人: 張春陽;胡娟;劉明昊
• 申請（專利權）人: 山東師范大學
• 主分類號: C12Q1/44
• 分類號: C12Q1/44;C12Q1/34;C12N15/11;G01N21/64
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

1.一種同時檢測hOGG1和hAAG的熒光化學傳感器，其特征在于，所述熒光化學傳感器包括：hOGG1分子信標、hAAG分子信標和脫嘌呤/脫嘧啶核酸內切酶；

其中，所述hOGG1分子信標為一個具莖環結構的發夾DNA探針，兩條莖結構互補形成雙鏈DNA，所述雙鏈DNA具有hOGG1的識別位點；所述分子信標的莖結構兩個末端分別用熒光基團I和淬滅基團I標記；所述hOGG1的識別位點為8-羥基鳥嘌呤/胞嘧啶堿基對；

所述hAAG分子信標為一個具莖環結構的發夾DNA探針，兩條莖結構互補形成雙鏈DNA，所述雙鏈DNA具有hAAG的識別位點；所述分子信標的莖結構兩個末端分別用熒光基團II和淬滅基團II標記；所述hAAG的識別位點為脫氧次黃嘌呤/胸腺嘧啶堿基對；

所述hOGG1分子信標長度為34 nt，所述hOGG1分子信標的堿基序列為：5'-Cy3-GGT CTO ATG GGG GAC ACG ACA CCC CCA TCA GAC C-BHQ2-3'，其中下劃線標出的堿基序列即為hOGG1分子信標莖結構堿基序列，下劃線標出的堿基O即8-羥基鳥嘌呤，所述hOGG1分子信標5'端標記有熒光基團Cy3，3'端標記有淬滅基團BHQ2；

所述hAAG分子信標長度為34 nt，所述hAAG分子信標的堿基序列為： 5'-Cy5-CTC GIG GCA GCT CAG TAC AGG AAG CTG CCT CGA G- BHQ3-3'，其中下劃線標出的堿基序列即為hAAG分子信標莖結構堿基序列，下劃線標出的堿基I即脫氧次黃嘌呤，所述hAAG分子信標5'端標記有熒光基團Cy5，3'端標記有淬滅基團BHQ3。

2.如權利要求1所述的一種熒光化學傳感器，其特征在于，所述熒光基團I與熒光基團II為兩個發射光譜之間沒有明顯光譜重疊和串擾的熒光基團。

3.如權利要求1所述的一種熒光化學傳感器，其特征在于，所述熒光基團I為Cy3，所述淬滅基團I為BHQ2淬滅劑；所述熒光基團II為Cy5，所述淬滅基團II為BHQ3淬滅劑。

4.如權利要求1所述的一種熒光化學傳感器，其特征在于，所述hOGG1分子信標和hAAG分子信標莖結構堿基序列長度均為12~13個堿基。

5.權利要求1-4任一項所所述熒光化學傳感器和在篩選hOGG1/或hAAG抑制劑/激活劑中的應用。