[發明專利]一種通過誘導不定芽獲得大花萱草再生植株的方法

在審

• 申請號: 201711025807.0
• 申請日: 2017-10-27
• 公開（公告）號: CN109717075A
• 公開（公告）日: 2019-05-07
• 發明（設計）人: 楊柳燕;王藝程;張永春;蔡友銘
• 申請（專利權）人: 上海市農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海開祺知識產權代理有限公司 31114
• 代理人: 張曉敏;費開逵

1.一種通過誘導不定芽獲得大花萱草再生植株的方法，包括以下步驟：

1)外植體選擇、預處理

選取長度為1-2cm的根莖幼芽作為外植體，去除根系及葉片，消毒，無菌水浸洗，吸干水分，除去基部老化組織；

2)誘導不定芽

將經過預處理的外植體，接種于誘導培養基中，誘導培養28-35天，得到不定芽；

其中，培養條件為：溫度23-27℃，濕度60-80％，光照10-12h/d，光照強度為1500-2500LX；

3)增殖培養

將步驟2)中獲得的不定芽切分為單株，切去多余的基部組織以及愈傷組織，接種至增殖培養基中，培養28-35天，得到叢生芽；

其中，培養條件為：溫度23-27℃，濕度60-80％，光照10-12h/d，光照強度為1500-2500LX；

4)生根培養

將步驟3)中的叢生芽切分成單株，去除不定芽、愈傷組織及老化的基部，接種于生根培養基，進行生根培養，得到生根苗；

培養條件為：溫度23-27℃，濕度60-80％，光照10-12h/d，光照強度為1500-2500LX；

5)煉苗、移栽

將步驟4)中的生根苗取出，清洗，根系蘸殺菌劑，先在溫室中弱光煉苗10～15天，溫度20～25℃，再于自然光照下，煉苗10～20天，獲得大花萱草再生植株。

2.根據權利要求1所述通過誘導不定芽獲得大花萱草再生植株的方法，其特征在于，步驟2)中，所述誘導培養基以MS培養基為基本培養基，添加了6-芐氨基嘌呤1-5mg/L、萘乙酸1-5mg/L、蔗糖20-40g/L、瓊脂3-5g/L，pH為5.8-6.0。

3.根據權利要求1或2所述通過誘導不定芽獲得大花萱草再生植株的方法，其特征在于，步驟3)中，所述增殖培養基以MS培養基為基本培養基，添加了6-芐氨基嘌呤1-3mg/L、萘乙酸0.1-1mg/L、蔗糖20-40g/L、瓊脂3-5g/L，pH為5.8-6.0。

4.根據權利要求1-3任一項所述通過誘導不定芽獲得大花萱草再生植株的方法，其特征在于，步驟4)中，所述生根培養基以1/2MS培養基為基本培養基，添加了萘乙酸0.5-2mg/L、活性炭0.1-1g/L、蔗糖20-40g/L、瓊脂3-5g/L，pH為5.8-6.0。

5.根據權利要求1所述通過誘導不定芽獲得大花萱草再生植株的方法，其特征在于，步驟2)中，將經過預處理的外植體切分為2-4塊。

6.根據權利要求1所述通過誘導不定芽獲得大花萱草再生植株的方法，其特征在于，步驟3)中，進行切分的不定芽株高在1.5-2cm。

7.根據權利要求1所述通過誘導不定芽獲得大花萱草再生植株的方法，其特征在于，步驟4)中，進行切分的叢生芽株高≥2cm。

8.根據權利要求1所述通過誘導不定芽獲得大花萱草再生植株的方法，其特征在于，所述步驟5)煉苗、移栽過程的基質中，泥炭：珍珠巖＝(1：1)～(7：3)，體積比。

9.根據權利要求1所述通過誘導不定芽獲得大花萱草再生植株的方法，其特征在于，步驟5)中，所述殺菌劑為五氯硝基苯可濕粉劑、多菌靈、或百菌清。