[發明專利]一種具有主動止血功能的多聚糖基止血海綿、制備工藝及應用

在審

• 申請號: 201711023401.9
• 申請日: 2017-10-27
• 公開（公告）號: CN107823701A
• 公開（公告）日: 2018-03-23
• 發明（設計）人: 石長燦;馮亞凱;陳浩;楊嘯;劉雯;李娜;席光輝
• 申請（專利權）人: 溫州生物材料與工程研究所
• 主分類號: A61L24/08
• 分類號: A61L24/08;A61L24/10;A61L24/00
• 代理公司: 溫州甌越專利代理有限公司33211
• 代理人: 王庭輝

技術領域

本發明屬于主動止血材料技術領域，也涉及生物醫用高分子材料及生物相容性改性領域，具體涉及一種具有高吸水性、可降解和無毒性的一種具有主動止血功能的接枝改性多聚糖基止血海綿及制備工藝及應用。

背景技術

在突發性事故的急救、手術以及在戰爭中，50%的死亡是因大量出所血導致。一些傳統的止血材料，例如止血紗布、止血繃帶、止血棉紗等，他們的止血能力有限，止血效果并不十分理想。因此，開發出高效而且快速可吸收的止血材料及產品，在出血發生后的1-2分鐘，甚至更短的時間內，有效地快速止血，這成為止血材料研發的主要目標之一。

止血材料根據其止血原理，可大致可以分為主動止血材料與被動止血材料兩類。主動止血材料的主要成分為纖維蛋白原、凝血酶或含有纖維蛋白原及止血酶。此類止血產品主要激活體內生理凝血級聯反應的終末階段，促使纖維蛋白凝塊的形成，從而促進血液凝固。應用最為廣泛的是纖維蛋白膠和凝血酶制劑。但是，主動止血的材料價格一般比較昂貴，需要冷凍保存，具有潛在的病毒源性。此外，主動止血材料的使用過程中，還有引起局部或全身血管栓塞的可能性。因此，主動止血材料應用范圍受到了限制。

被動止血材料成分包括纖維素類、天然多聚糖類、明膠等。被動止血材料不具備生物活性，通過激活血小板，促進血小板聚集；或吸附紅細胞，濃縮血液中有效成分，或封堵出血創面，達到快速止血的目的。被動止血材料的原料來源于動物或植物，具有良好的生物相容性，并且其制備成本低廉，制備工藝簡便。然而，針對一些不可控的大出血，被動止血材料存在止血效果差的問題。

為了解決主動止血材料的潛在危險，Guofeng Li等采用交聯固化的方法，將具有主動凝血功能的無機材料-蒙脫土固定在石墨烯片層的內部，從而降低其進入血管，造成血栓的危險(ACS Appl. Mater. Interfaces 2016, 8, 35071?35080)。然而，在有機高分子，尤其是特異性多肽的固定和提高其生物安全性方面還沒有相應的報道。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種具有生物相容性好，止血速度迅速、使用安全、生物可降解的，且結合主動止血材料止血迅速的特點和被動止血材料的良好生物相容性的特點的一種具有主動止血功能的多聚糖基止血海綿。

為實現上述目的，本發明公開了一種具有主動止血功能的接枝改性多聚糖基止血海綿，其特征在于：所述止血海綿由接枝改性多聚糖、交聯劑和功能多肽構成，所述接枝改性多聚糖為接枝改性羥乙基纖維素、接枝改性殼聚糖、接枝改性淀粉、接枝改性海藻酸鈉和接枝改性透明質酸的一種或多種；所述交聯劑為二硫蘇糖醇、胱氨酸、HS-PEG-SH中的一種或多種，其中HS-PEG-SH的數均分子量為500-10000；所述功能多肽為SFLLRNPNDKYEPF、SFLLRNPND、SFLLRN中的一種或多種。

本發明的第二個目的是提供一種具有主動止血功能的多聚糖基止血海綿及制備工藝。

本發明的第三個目的是提供一種具有主動止血功能的多聚糖基止血海綿的用途。

為實現上述目的，本發明公開了一種具有主動止血功能的多聚糖基止血海綿的制備方法，包括如下步驟：

（1）將20g接枝改性多聚糖分散在超純水中，配置成質量濃度為5%-50%的接枝改性多聚糖懸濁液，升溫到60-120℃，反應1-5h后，冷卻至室溫。用乙醇水溶液（乙醇/水的質量比例為3/（10:1）洗滌3-5次，抽濾，室溫真空干燥。所述接枝改性多聚糖為羥乙基纖維素、殼聚糖、淀粉、海藻酸鈉和透明質酸的一種或多種。

（2）將（1）中所得產物的10g，分散到有機溶劑中，配置成質量分數為1%-10%的懸濁液。將懸濁液升溫至80-150℃，攪拌1-3h。之后，冷卻至室溫。向所得溶液中，加入1-5g反應試劑A，反應12-36h。提純。所述有機溶劑為二甲基亞砜，N,N-二甲基甲酰胺，N,N-二甲基乙酰胺中的一種或多種。所述的提純方法為：將所得產物置于透析袋中，透析2-7天，之后，將所得透析液冷凍干燥，得到產物。所述透析袋的截留分子量為3500-10000。

（3）將步驟（2）所得產物中的5g分散于超純水中，配置成質量分數為0.5%-5%的懸濁液。分別加入0.025g 催化劑A，0.5-2.5g反應試劑B之后，采用紫外光（光照強度為10-200μW/cm²）輻照60-300s。利用PBS清洗所得反應產物3-5次，之后將所得產物冷凍干燥，得到多孔海綿狀產物。