[發明專利]一種均相免疫檢測方法及其應用

有效

• 申請號: 201711017639.0
• 申請日: 2017-10-26
• 公開（公告）號: CN109725153B
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 王志新;劉宇卉;李臨
• 申請（專利權）人: 科美診斷技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/569
• 代理公司: 北京聿宏知識產權代理有限公司 11372
• 代理人: 吳大建;桑勝梅

1.一種均相免疫檢測方法，其包括至少兩個檢測區域，在一個檢測區域判斷是否存在由供體-待檢抗體-受體所形成的第一復合物，而在另一個檢測區域判斷是否存在由供體-待檢抗原-受體所形成的第二復合物；其中，所述供體能夠在激發狀態下生成單線態氧，所述受體能與單線態氧反應產生可檢測的信號；

所述的待檢抗原和待測抗體來自同一病毒樣本，且兩個檢測區域加入不同的樣本量，所述判斷是否存在由供體-待檢抗體-受體所形成的第一復合物的檢測區域中加入的待檢樣本為稀釋的待檢樣本。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，當檢測區域存在第一復合物和/或第二復合物時，用能量或者活性化合物激發供體產生單線態氧，所述受體與單線態氧反應生成可檢測的化學發光信號。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述待檢抗體選自與待檢抗原特異性結合的完整抗體或基因工程化的抗體片段。

4.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述待檢抗原選自多種不同病毒類型的抗原。

5.根據權利要求1或2述的方法，其特征在于，所述待檢抗原選自同一被分析物的不同亞型、亞亞型或流行重組型的抗原。

6.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述受體和待檢抗體通過標記抗原相連接；所述供體和待檢抗體通過中間抗原相連接；所述標記抗原和中間抗原能夠與待檢抗體的不同表位特異性結合。

7.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述受體和待檢抗原通過標記抗體相連接；所述供體和待檢抗原通過中間抗體相連接；所述標記抗體和中間抗體能夠與待檢抗原的不同表位特異性結合。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述標記抗體為單克隆抗體。

9.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述中間抗體為多克隆抗體。

10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，其在一個檢測區域準備第一組合物，并判斷第一組合物中是否存在由供體-待檢抗體-受體所形成的第一復合物；在另一個檢測區域準備第二組合物，并判斷第二組合物中是否存在由供體-待檢抗原-受體所形成的第二復合物；

其中，所述第一組合物包含：待檢樣本；與標記抗原結合的受體；中間抗原；供體；所述標記抗原和中間抗原能夠與待檢抗體的不同表位特異性結合；

所述第二組合物包含：待檢樣本；與標記抗體結合的受體；中間抗體；供體；所述標記抗體和中間抗體能夠與待檢抗體的不同表位特異性結合。

11.根據權利要求10所述的方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

步驟S1，在一個反應區域準備第三組合物，所述第三組合物包含：待檢樣本、與標記抗原結合的受體以及中間抗原；在另一個反應區域準備第四組合物，所述第四組合物包含：待檢樣本、與標記抗體結合的受體以及中間抗體；

步驟S2，將供體加入到第三組合物中，獲得第一組合物；將供體加入到第四組合物中，獲得第二組合物；

步驟S3，將第一組合物和第二組合物分別送到檢測區域，然后用能量或者活性化合物接觸檢測區域，激發供體產生單線態氧；當存在第一復合物和/或第二復合物時，所述受體與單線態氧反應生成可檢測的化學發光信號；

步驟S4，檢測所述化學發光信號，判斷待檢樣本中是否存在待檢抗體和/或待檢抗原以及待檢抗體和/或待檢抗原的含量或濃度。

12.根據權利要求10或11所述的方法，其特征在于，所述第一組合物中的待檢樣本在加入第一組合物前預先用稀釋液進行稀釋，形成稀釋的待檢樣本。

13.根據權利要求12所述的方法，其特征在于，所述稀釋的待檢樣本的體積稀釋倍數為1:(4-20)。