[發明專利]一種提取板藍根干樣基因組DNA的方法在審
| 申請號： | 201711017592.8 | 申請日： | 2017-10-26 |
| 公開（公告）號： | CN107586773A | 公開（公告）日： | 2018-01-16 |
| 發明（設計）人： | 鄒志文;許睿;夏斌;辛天蓉;王靜;奚劍飛 | 申請（專利權）人： | 南昌大學 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 南昌新天下專利商標代理有限公司36115 | 代理人： | 施秀瑾 |
| 地址： | 330031 江西省*** | 國省代碼： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 提取 板藍根 基因組 dna 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種提取板藍根干樣基因組DNA的方法，其特征是按如下步驟：
（1）取去除表皮的板藍根干樣組織0.05~0.1 g，使用液氮在研缽中研磨成粉末，在組織解凍前轉移到1.5mL離心管中；
（2）加入500~750 μL的 2%的CTAB溶液，顛倒混勻后在65℃水浴2~3 h，期間要上下顛倒混勻數次；
（3）取出離心管，加入與步驟（2）等體積的按24:1體積比混合的三氯甲烷與異戊醇的混合液，上下顛倒充分混合，晃動數次；
（4）4℃條件下14000 rpm 離心15min；
（5）用移液槍吸取管中上層水相；
（6）在抽提出的水相中加入與等體積4℃下預冷的異丙醇，輕輕晃動混勻后在-20 ℃沉淀6~12小時；
（7）4℃條件下14000 rpm 離心15min，去上清，倒置于吸水紙上控干；
（8）加入與步驟（2）等體積的無水乙醇，上下顛倒數次，洗滌沉淀，4℃條件下12000 rpm離心10min離心，去上清，倒置于吸水紙上控干；
（9）重復步驟（8）兩遍；
（10）將步驟（9）所得沉淀置于超凈工作臺中吹干；
（11）在離心管中加入30~50 μL的滅菌去離子水或者TE緩沖液(Tris-EDTA buffer solution)，4℃放置4~6小時；
（12）-20℃或-80℃低溫保存。
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