[發明專利]一種TNF-α拮抗劑應答療效SNP位點檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201711016446.3
• 申請日: 2017-10-25
• 公開（公告）號: CN108330179A
• 公開（公告）日: 2018-07-27
• 發明（設計）人: 杜予和
• 申請（專利權）人: 廣州和康醫療技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 深圳市千納專利代理有限公司 44218
• 代理人: 胡堅

一種TNF?α拮抗劑應答療效SNP位點檢測試劑盒,本發明涉及分子生物學和醫學領域，本試劑盒針對人類基因組DNA中腫瘤壞死因子拮抗劑應答效應預測的5個SNP位點設計特異性引物和探針，與攜帶相應報告探針的agPlex?TAG磁珠進行雜交反應，通過顯色反應在luminex 200儀器上進行檢測。通過對信號值的讀取判讀各個SNP位點的堿基型別進行判定。本發明的有益效果在于：本發明針對類風濕關節炎、強直性脊柱炎、銀屑病等患者使用腫瘤壞死因子拮抗劑的有效性相關基因位點設計特異引物和探針以及相應報告探針，可分型檢測5個SNP位點的型別；檢測試劑盒可以靈敏、快速低檢測人全血樣本中5個SNP型別，結合多個SNP位點可對患者使用腫瘤壞死因子拮抗劑治療有效性進行預測。

技術領域

本發明涉及分子生物學和醫學領域，更具體的，本發明涉及一組腫瘤壞死因子拮抗劑應療效SNP位點檢測的試劑盒。通過同時檢測腫瘤壞死因子拮抗劑應答療效密切相關的TNF-a基因、TNFRSF1B基因和FCGR3A基因的單核苷酸多態性位點(SNP)基因型來評估腫瘤壞死因子拮抗劑在克羅恩病、強直性脊柱炎，銀屑病關節炎等炎癥性疾病的應答效應。

背景技術

腫瘤壞死因子α是風濕性疾病，尤其是類風濕關節炎發病機制中最重要的細胞因子之一，其主要的生物學作用包括：導致關節炎癥和軟骨破壞，誘導其他炎性細胞因子的釋放，介導感染和敗血癥，參與腫瘤監視等。腫瘤壞死因子α拮抗劑可以通過與腫瘤壞死因子α特異性結合而阻斷腫瘤壞死因子α生物活性的發揮，從而達到控制炎癥、持續緩解病情的目的。

腫瘤壞死因子(TNF)-α拮抗劑已成為治療風濕性疾病最有力的武器之一。目前臨床使用的TNF-α拮抗劑主要有依那西普、阿達木單抗和英夫利昔單抗，它們均可緩解及阻止類風濕關節炎的臨床及影像學進展，顯著減輕類風濕關節炎患者的癥狀、改善功能及提高生活質量等；可顯著改善銀屑病性關節炎患者的關節炎癥狀，減緩其影像學進展。可降低強直性脊柱炎患者的疾病活動度，延緩影像學進展以及改善生活質量。長期隨訪研究顯示TNF-α拮抗劑用于類風濕關節炎，強直性脊柱炎和銀屑病關節炎治療安全有效。

腫瘤壞死因子(TNF)-α拮抗劑費用昂貴，部分患者初次治療，臨床療效不佳甚至無反應，而且接受治療的患者有出現結核、真菌、細菌感染等并發癥的風險，尋找能預測AS患者對TNF-α拮抗劑治療有效性的標志物顯得十分重要。

多項研究及Meta分析提示：TNF-α-308G(rs1800629),TNF-α-857C(rs1799724),TNF-a 238G(rs361525),TNFRSF1B 676T(rs1061622),FCGR3A449G(rs396991)與使用腫瘤壞死因子抑制劑治療應答相關。

TNF-α啟動子-308啟動子G/A位點和AS有關。-308位點GA+AA基因型與AS骶髂關節炎嚴重程度可能存在關聯。有研究表明使用TNF-α拮抗劑24周后，TNF-a-308G/G純合子的AS患者BASDAI改善優于A/A、A/G的患者。TNF-α拮抗劑有效的患者中-308A基因頻率為22％，而無效的患者中-308A基因頻率為37％。

已有研究表明rs1799724(-857C/T)單核苷酸多態性與AS有顯著關聯,-857T是中國南方人群AS發病的危險因素。-857TT純合子較CT雜合子對TNF-a拮抗劑6周治療后的AS病人的炎癥指標、BASFI改善更顯著。在治療類風濕關節炎患者中，使用TNF-a抑制劑(依那西普)治療后，TNF-308AA基因型對其應答反應明顯較TNF-308GG基因型。TNF-238GA基因型患者對英夫利昔單抗的應答較GG基因型差。