[發明專利]一種具有降血壓降血脂功效的絞股藍生物活性物質與人源干細胞活性因子組合物的制備方法

在審

• 申請號: 201711014620.0
• 申請日: 2017-10-25
• 公開（公告）號: CN107744525A
• 公開（公告）日: 2018-03-02
• 發明（設計）人: 張正亮;吳茂林
• 申請（專利權）人: 安徽科門生物科技有限公司;安徽利民生物科技股份有限公司
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;C08B37/00;A61P9/12;A61P3/06;A61P3/10;A61P1/16;A61P29/00;A61P39/02;A61P11/14;A61P11/10;A61K31/715
• 代理公司: 北京力量專利代理事務所(特殊普通合伙)11504
• 代理人: 毛雨田

1.一種具有降血壓降血脂功效的絞股藍生物活性物質與人源干細胞活性因子的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

S1、人源間充質干細胞體外培養；

S2、細胞培養至若干小時后，收集上清至離心管，過濾上清除菌；

S3、加入生理鹽水繼續培養12小時，破碎細胞離心過濾膜得到干細胞提取液；

S4、絞股藍中提取粗糖；

S5、粗糖提純得到多糖粉末；

S6、將干細胞提取液與多糖粉末按照質量比5-6：1充分混合即得。

2.根據權利要求1所述的一種具有降血壓降血脂功效的絞股藍生物活性物質與人源干細胞活性因子的制備方法，其特征在于：所述S1的具體步驟為，取人源間充質干細胞復蘇后，用生理鹽水重懸，懸液接種于完全培養基中，置于37℃，5％CO₂培養箱中培養，培養24h后第一次換液并去除貼壁細胞，之后每隔2d換液一次，當細胞生長至85％匯合度后以1：2比例進行傳代培養。

3.根據權利要求2所述的一種具有降血壓降血脂功效的絞股藍生物活性物質與人源干細胞活性因子的制備方法，其特征在于：所述完全培養基為DF12培養基，所述培養基中含體積分數為2％胎牛血清、40％MCDB201、10μg/L血小板衍生生長因子、10μg/L堿性成纖維細胞生長因子、10μg/L表皮生長因子。

4.根據權利要求1所述的一種具有降血壓降血脂功效的絞股藍生物活性物質與人源干細胞活性因子的制備方法，其特征在于：所述S4的具體步驟為，稱取絞股藍破碎后，加入95％乙醇溶解后回流提取，常溫揮發乙醇得到絞股藍粉末，將絞股藍粉末分散于蒸餾水中，提取收集上清液，將上清液減壓濃縮至原體積的1/3，離心除去沉淀，上清液加入乙醇溶液，靜置、離心得到白色絮狀沉淀，將白色絮狀沉淀分散于無水乙醇溶液中，充分攪拌后離心，沉淀真空干燥得到粗糖粉末。

5.根據權利要求1所述的一種具有降血壓降血脂功效的絞股藍生物活性物質與人源干細胞活性因子的制備方法，其特征在于：所述S5中的具體步驟為，將粗糖粉末分散于蒸餾水中，4℃靜置12-16h后離心，上清液加入至氯仿-正丁醇混合溶液中，固液比為5-6：1，其中所述混合溶液中氯仿與正丁醇的體積比為5：1，混合溶液離心得到多糖粉末。

6.一種根據權利要求1所述的具有降血壓降血脂功效的絞股藍生物活性物質與人源干細胞活性因子的制備方法，其特征在于，干細胞提取液與多糖粉末按照質量比5-6：1充分混合后得到。