[發明專利]一種3;4;6三取代-α-吡喃酮衍生物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201711011005.4
• 申請日: 2017-10-25
• 公開（公告）號: CN107954964B
• 公開（公告）日: 2019-09-03
• 發明（設計）人: 肖燁;丁立建;何山;姚佳曉;孫晴鎂
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C07D309/36
• 分類號: C07D309/36;C12P17/06;A01N43/16;A01P3/00;C12R1/66
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 何仲

本發明公開了一種3,4,6三取代?α?吡喃酮衍生物及其制備和應用，特點是該3,4,6三取代?α?吡喃酮衍生物的結構式如Ⅰ所示，其制備方法步驟包括通過保藏號為CCTCC No.M2014089的海洋曲霉菌發酵培養來獲取含新3,4,6三取代?α?吡喃酮衍生物的發酵物，然后將發酵物用甲醇浸泡、乙酸乙酯提取，得粗浸膏，將該粗浸膏經減壓硅膠柱層析和反相半制備高效液相色譜分離純化得到，該3,4,6三取代?α?吡喃酮衍生物具有抗番茄灰霉病菌作用，優點是可以作為番茄灰霉病菌抑制劑的新藥物成分或先導化合物。

技術領域

本發明涉及一種3,4,6三取代-α-吡喃酮衍生物，尤其是涉及一種用海洋曲霉菌制備3,4,6三取代-α-吡喃酮衍生物的方法以及該類化合物在制備番茄灰霉病菌抑制劑的應用。

背景技術

微生物一直是生物農藥開發的重要資源，微生物來源的生物農藥如井岡霉素(jinggongmycin)、春雷霉素(kasugamycin)、多抗霉素(polyoxin)、農抗120(agriculturalantibiotic 120)、武夷菌素(wuyiencin M)、慶豐霉素(qingfengmycin)等已被廣泛應用于防治植物病害。但近年來，相同的化學活性物質的被重復發現卻長期困擾著該領域的研究人員。因此，不斷擴大篩選對象，發現新的農用抗菌物質，研制出更多具有自主知識產權的農用抗生素，已成為當務之急，具有十分重要的社會意義。

海洋微生物生活在高鹽、高壓、低溫、無光照、寡營養等特殊環境中，這種特殊的環境造就了海洋微生物具有多種途徑的代謝方式，致使其能產生結構新穎獨特、具有多種特殊活性的代謝產物，是開發新型農用抗菌物質的重要來源。本發明人研究得知，海洋曲霉菌Aspergillus versicolor DJ013 （保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為：CCTCCNo: M2014089）的大米發酵的乙酸乙酯提取物有較好的抗番茄灰霉病菌活性，遂對其活性成分進行了研究。目前尚未見該化合物的化學結構及抗番茄灰霉病菌活性的報道，因此市場上也尚未見有與此相關的藥物。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種具有抗番茄灰霉病菌活性的3,4,6三取代-α-吡喃酮衍生物及其制備方法和應用。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種3,4,6三取代-α-吡喃酮衍生物，該3,4,6三取代-α-吡喃酮衍生物的結構式如Ⅰ所示：

（I）。

上述3,4,6三取代-α-吡喃酮衍生物的制備方法，具體包括如下步驟：

（1）發酵生產

將保藏號為CCTCC No. M2014089的花斑曲霉（Aspergillus versicolor DJ013）劃線復活，轉接到裝有100 mL PDB培養基的250mL錐形瓶中，于28℃、180 r/min培養4天，獲得種子培養液；然后按體積比10%的接種量將種子液接種到大米培養基中，于28℃靜置培養35天，獲得發酵物；

（2）浸膏的獲得

將上述發酵物用甲醇浸泡3次，而后對甲醇浸提液濃縮蒸干，用水復溶，再用與水等體積的乙酸乙酯重復萃取3次，合并三次萃取所得萃取液，將萃取液減壓濃縮除去乙酸乙酯，獲得粗浸膏；

（3）化合物的分離精制

將上述粗浸膏用二氯甲烷和甲醇混合溶劑溶解后，加200-300目硅膠拌樣，采用石油醚/乙酸乙酯以體積比10:1梯度為洗脫劑進行洗脫，對粗浸膏進行減壓硅膠柱層析，收集洗脫組分，再經過半制備反相高效液相色譜進行分離純化得到3,4,6三取代-α-吡喃酮衍生物，其結構如式I所示：

（I）。