[發(fā)明專利]一種黃芪破壁飲片活性成分的血藥濃度定量分析方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711010087.0
• 申請日: 2017-10-25
• 公開（公告）號: CN107907619A
• 公開（公告）日: 2018-04-13
• 發(fā)明（設計）人: 楊澤銳;陳莎;成金樂;鄧雯;鄧銀愛;徐吉銀;王義娜
• 申請（專利權）人: 中山市中智藥業(yè)集團有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司44102
• 代理人: 陳衛(wèi)

1.一種黃芪破壁飲片活性成分的血藥濃度定量分析方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

S1：制備線性梯度溶液、質(zhì)控品溶液和內(nèi)標溶液，建立標準曲線；

S2：血漿樣品處理；

S3：采用HPLC-MS進行測定；其中，流動相A為甲酸水溶液，流動相B為甲酸乙腈溶液；梯度洗脫條件為： 0.0～5.0 min：A流動相： 85%→50%；5.0～9.0 min：A流動相： 50%→30%；9.0～9.5 min：A流動相： 30%→10%；9.5～12.5 min：A流動相：10%；12.5～13 min：A流動相：10%→85%；質(zhì)譜參數(shù)為：離子源為：電噴霧離子源（ESI），檢測方式為正離子，毛細管電壓為3500V，掃描方式為MRM，氮氣溫度300℃，氮氣流速5L/min，鞘氣溫度250℃，鞘氣流速11L/min，噴嘴電壓500V。

2.根據(jù)權利要求1所述黃芪破壁飲片活性成分的血藥濃度定量分析方法，其特征在于，所述活性成分為黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊異黃酮或芒柄花素中的一種或數(shù)種。

3.根據(jù)權利要求1所述黃芪破壁飲片活性成分的血藥濃度定量分析方法，其特征在于，所述流動相A和流動相B中甲酸的體積分數(shù)為0.1%。

4.根據(jù)權利要求2所述黃芪破壁飲片活性成分的血藥濃度定量分析方法，其特征在于，所述線性梯度溶液中黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊異黃酮和芒柄花素的濃度依次為0.91~468.00ng/mL、0.98~504.00ng/mL、0.94~482.90ng/mL、0.95~489.00ng/mL和0.97~499.80ng/mL范圍內(nèi)的至少5個不同濃度。

5.根據(jù)權利要求2所述黃芪破壁飲片活性成分的血藥濃度定量分析方法，其特征在于，所述質(zhì)控品溶液中黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊異黃酮和芒柄花素的濃度依次為4.68~468.00ng/mL、5.04~504ng/mL、4.83~482.80ng/mL、4.89~489.00ng/mL和5.00~499.80ng/mL范圍內(nèi)的至少3個不同濃度。

6.根據(jù)權利要求1所述黃芪破壁飲片活性成分的血藥濃度定量分析方法，其特征在于，所述內(nèi)標溶液為柚皮素甲醇溶液，所述內(nèi)標溶液中柚皮素的濃度為294ng/mL。

7.根據(jù)權利要求1所述黃芪破壁飲片活性成分的血藥濃度定量分析方法，其特征在于，所述血漿樣品制備步驟如下：

S1：向黃芪破壁飲片中加入水，研磨均勻得供試藥液；

S2：將供試藥液灌胃于動物體內(nèi)，眼眶取血，分離血漿，冷凍備用；

S3：內(nèi)標溶液置于離心管中，吹干后再加入解凍后血漿、蛋白沉淀劑，混合、超聲、離心后取上清液吹干，復溶，混合、超聲、離心后所得上清液即為所述血漿樣品。

8.根據(jù)權利要求1所述黃芪破壁飲片活性成分的血藥濃度定量分析方法，其特征在于，所述血漿樣品的質(zhì)量濃度為0.14～0.21g/ml。

9.根據(jù)權利要求1所述黃芪破壁飲片活性成分的血藥濃度定量分析方法，其特征在于，色譜條件為：流速為0.2mL/min；進樣體積為2μL；進樣溫度為20℃；色譜柱為Agilent XDB-C18；柱溫箱為30℃；運行時間為13min；洗針液為50%甲醇。