[發明專利]一種含益生菌提取活性因子的眼用制劑及其制備方法

在審

• 申請號: 201711005777.7
• 申請日: 2017-10-25
• 公開（公告）號: CN107744529A
• 公開（公告）日: 2018-03-02
• 發明（設計）人: 錢陳;趙方坤;杜鳳昆;甘毅
• 申請（專利權）人: 常州諳美生物科技有限公司
• 主分類號: A61K35/747
• 分類號: A61K35/747;A61K9/08;A61P27/02;A61P39/06;A61P39/00;A61K31/045;A61K31/185;A61K33/14;A61K35/741;A61K35/745
• 代理公司: 常州市權航專利代理有限公司32280
• 代理人: 黃晶晶

1.一種含益生菌提取活性因子的眼用制劑，其特征在于，包括如下組分：

其中，所述EM因子為益生菌的提取物溶液。

2.如權利要求1所述的含益生菌提取活性因子的眼用制劑，其特征在于，包括如下組分：

3.如權利要求1所述的含益生菌提取活性因子的眼用制劑，其特征在于，包括如下組分：

4.如權利要求1～3任一項所述的含益生菌提取活性因子的眼用制劑，其特征在于，所述EM因子通過如下方法得到：

(1)將益生菌置于溶劑中得混合液，采用物理方法裂解益生菌，并離心，取上清液；

(2)將上清液加入陰離子交換柱進行分離，分別收集每個組分；

(3)檢測并去除無多糖的組分以及含有蛋白質的組分，即粗品；

(4)將粗品進一步通過疏水層析、分子排阻提純。

5.如權利要求4所述的含益生菌提取活性因子的眼用制劑，其特征在于，所述益生菌選自雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬或擬桿菌屬中的任意一種或幾種。

6.根據權利要求4所述的含益生菌提取活性因子的眼用制劑，其特征在于：所述步驟(1)中混合液中菌的重量百分數為5％～45％；

所述裂解的方法選自超聲波裂解儀裂解、組織破碎儀裂解或高壓均質機等物理方法裂解方式中的任意一種或幾種；

所述離心的條件為8000g～30000g/分，時間是10～60分鐘。

7.如權利要求4所述的含益生菌提取活性因子的眼用制劑，其特征在于,所述步驟(2)中洗脫前使用平衡液調整陰離子交換柱，所述平衡液選自10-300mM、pH 6.5-8.5的Tris-HCl溶液或10-200mM pH 6-9的磷酸溶液；

所述洗脫液選用10-300mM Tris-HCl/1M氯化鈉溶液或10-200mM的磷酸溶液/1M氯化鈉溶液；pH為6.0-8.5。

8.如權利要求4所述的益生含益生菌提取活性因子的眼用制劑，其特征在于，所述步驟(4)將粗品進一步通過包括分子排阻層析和濾膜進一步純化，所述分子排阻層析中平衡液選自10-300mM pH 6.5-8.5的Tris-HCl溶液或10-200mM pH 6-9的磷酸溶液；收集多糖組分并通過孔徑小于等于0.22μm的濾膜。

9.一種如權利要求1～3任一項所述的含益生菌提取活性因子的眼用制劑的制備方法，包括如下步驟：將各原料組分混合均勻后，經過活性碳吸附純化，去除可能的內毒素；離心去除活性炭，再過0.22微米膜過濾去除剩余雜質；進而進行分裝，然后高溫濕熱滅菌，最后進行包裝。

10.如權利要求9所述的含益生菌提取活性因子的眼用制劑的制備方法，其特征在于，所述制備方法在萬級潔凈度環境中進行。