[發(fā)明專利]一種用于檢測登革病毒的熒光RT?RAA引物、探針及檢測方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201711005655.8
• 申請日: 2017-10-25
• 公開（公告）號: CN107619885A
• 公開（公告）日: 2018-01-23
• 發(fā)明（設計）人: 周冬根;羅潔;應清界;俞雪鈞
• 申請（專利權）人: 寧波國際旅行衛(wèi)生保健中心
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙)11548
• 代理人: 董濤

1.一種用于檢測登革病毒的引物對，其特征在于，所述引物對包括下述1)-3)中的至少一種：

1)序列表中SEQ ID№：1所示核苷酸序列和序列表中SEQ ID№：2所示核苷酸序列；

2)在高嚴謹條件下可與序列表中SEQ ID№：1限定的核苷酸序列雜交的核苷酸序列；和在高嚴謹條件下可與序列表中SEQ ID№：2限定的核苷酸序列雜交的核苷酸序列；

3)與1)、或2)限定的核苷酸序列具有90％以上同源性，且具有相同功能的核苷酸序列。

2.一種用于檢測登革病毒的探針，其特征在于，所述探針包括下述1)-3)中的至少一種：

1)所述探針的核苷酸序列為：

5'-CATTTTCTGGCGTTCTGTGCCTGGAATGATGNTGMNGAGACAGCAGGAT-3'，

其中，所述N代表任意核苷酸或任意修飾后的核苷酸，所述M代表具環(huán)狀結構的化合物；

2)在高嚴謹條件下可與1)所述的探針的核苷酸序列雜交的核苷酸序列；

3)與1)、或2)所述的探針的核苷酸序列具有90％以上同源性，且具有相同功能的核苷酸序列。

3.根據權利要求2所述的探針，其特征在于，所述探針的核苷酸序列為序列表中SEQ ID№：3所示核苷酸序列。

4.一種用于檢測登革病毒的組合物，其特征在于，所述組合物包括下述1)和2)：

1)權利要求1所述的引物對；

2)權利要求2或3任一所述的探針。

5.一種用于檢測登革病毒的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括下述1)-3)所述中的至少一種：

1)權利要求1所述的引物對；

2)權利要求2或3任一所述的探針；

3)權利要求4所述組合物。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，當所述試劑盒同時包括所述的引物對和所述的探針時，所述的引物對與所述的探針的摩爾比為4：4：1。

7.一種登革病毒的檢測方法，其特征在于：所述檢測方法不包括疾病的診斷或治療的方法；所述檢測方法包括使用下述1)-3)中的至少一種進行檢測：

1)權利要求1所述的引物對；

2)權利要求2或3任一所述的探針；

3)權利要求4所述組合物。

8.根據權利要求7所述的檢測方法，其特征在于：所述檢測方法還包括下述1)-2)中的至少一種：

1)當所述檢測方法同時使用了所述的引物對和所述的探針時，所述的引物對與所述的探針的摩爾比為4：4：1；

2)提取待檢測樣品的RNA進行RT-RAA反應，所述RT-RAA反應的反應溫度包括39℃；反應時間包括20分鐘以上。

9.權利要求1所述引物對、權利要求2或3任一所述探針、權利要求4所述組合物、權利要求5-6任一所述試劑盒、權利要求7-8任一所述檢測方法在檢測登革病毒中的應用，所述應用不包括涉及疾病的診斷或治療方法的應用。

10.權利要求1所述引物對、權利要求2或3任一所述探針、權利要求4所述組合物、權利要求5-6任一所述試劑盒、權利要求7-8任一所述檢測方法在制備檢測登革病毒相關產品中的應用。