[發明專利]一種耐高溫云耳菌株的室內篩選方法在審
| 申請號： | 201711003977.9 | 申請日： | 2017-10-24 |
| 公開（公告）號： | CN107557307A | 公開（公告）日： | 2018-01-09 |
| 發明（設計）人： | 陳雪鳳;吳圣進;王燦琴;吳小建;韋仕巖 | 申請（專利權）人： | 廣西壯族自治區農業科學院微生物研究所 |
| 主分類號： | C12N1/14 | 分類號： | C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京國坤專利代理事務所(普通合伙)11491 | 代理人： | 黃耀鈞 |
| 地址： | 530007 廣西*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 耐高溫 菌株 室內 篩選 方法 | ||
1.一種耐高溫云耳菌株的室內篩選方法，其特征在于，所述耐高溫云耳菌株的室內篩選方法：設置菌株在6個溫度梯度下培養7d，每個處理設3次重復；將活化5d的菌株菌絲圓片接種到PDA綜合培養基中央，置于40℃下不同培養時間后取出恢復培養；供試菌株活化5d后，挑取菌落邊緣菌絲塊圓片接種于PDA綜合平皿培養基中央培養，高溫鍛煉；供試菌株活化培養8d后，用于制作栽培菌種；栽培菌種滿袋后，將栽培種接入出菇袋培養基中培養50d，將出菇袋分別放到出菇條件下出耳。
2.如權利要求1所述的耐高溫云耳菌株的室內篩選方法，其特征在于，所述耐高溫云耳菌株的室內篩選方法包括以下步驟：
步驟一，設置6個溫度梯度，每個處理設3次重復；活化5d的菌株菌絲圓片接種到PDA綜合培養基中央，分別置于25℃，28℃，31℃，34℃，37℃，40℃的培養箱中培養7d，觀察菌絲生長情況，測量菌絲生長速率；
步驟二，活化好的菌株菌絲圓片接種到PDA綜合平皿培養基中央，置于40℃培養箱中分別培養3d、5d、7d、9d、11d后，再移出放置于25℃恢復培養7d，每個處理設3個重復，觀察菌絲生長情況，測量菌絲生長速度；
步驟三，供試菌株活化5d后，挑取菌落邊緣菌絲塊圓片接種于PDA綜合平皿培養基中央，置于40℃下培養5d，取出在28℃下恢復培養7d；挑選萌發生長較好的菌絲塊再接種于PDA綜合培養基上，放到42℃培養3d，取出在28℃下恢復培養7d，再挑選萌發生長較好的菌絲塊接種于PDA綜合培養基上，置于45℃培養5h后；取出在28℃下培養7d；各個溫度處理恢復生長7d后，觀察菌絲生長情況，測量菌絲生長速度；
步驟四：供試菌株活化培養8d后，制作栽培菌種；栽培菌種滿袋后，將栽培種接入出菇袋培養基中培養50d，將出菇袋分別放到25℃、28℃、31℃出菇條件下進行出耳，觀察現蕾情況。
3.如權利要求2所述的耐高溫云耳菌株的室內篩選方法，其特征在于，所述步驟一中菌絲生長速率(mm/d)＝菌落半徑(mm)/生長天數(d)。
4.一種由權利要求1～3任意一項所述耐高溫云耳菌株的室內篩選方法篩選的耐高溫云耳菌株，其特征在于，所述耐高溫云耳菌株為TY041、TY026、TY071、HME2、YE1。
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