[發明專利]一種具有抗幽門螺旋桿菌活性的抗菌肽的制備方法在審
| 申請號： | 201710995599.0 | 申請日： | 2017-10-23 |
| 公開（公告）號： | CN107641150A | 公開（公告）日： | 2018-01-30 |
| 發明（設計）人： | 張孝林;汪建飛;蔣安民;貢成良;范濤;張欽元 | 申請（專利權）人： | 安徽科技學院 |
| 主分類號： | C07K14/00 | 分類號： | C07K14/00;C07K19/00;C12N15/62;C12N15/866;C12N5/10;A61K38/16;A61P31/04 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371 | 代理人： | 蔡蓉 |
| 地址： | 239000*** | 國省代碼： | 安徽;34 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 具有 幽門 螺旋 桿菌 活性 抗菌 制備 方法 | ||
1.一種具有抗幽門螺旋桿菌活性的抗菌肽的制備方法，其特征在于，其包括：
構建編碼包含SEQ ID NO:1所示的抗菌肽的融合蛋白的核苷酸序列；
構建包含所述核苷酸序列的重組載體；
將所述重組載體用于轉化或轉染宿主細胞，并使所述核苷酸序列在所述宿主細胞中表達。
2.根據權利要求1所述的抗菌肽的制備方法，其特征在于，所述融合蛋白具有以下一級氨基酸序列結構：
載體蛋白-連接肽-蛋白酶作用位點肽段-抗菌肽；
所述抗菌肽具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
3.根據權利要求2所述的抗菌肽的制備方法，其特征在于，所述載體蛋白包括家蠶桿狀病毒核多角體蛋白、谷胱甘肽巰基轉移酶、綠色熒光蛋白、或泛素樣小蛋白。
4.根據權利要求2所述的抗菌肽的制備方法，其特征在于，所述蛋白酶作用位點肽段為特異性蛋白內切酶的作用位點，所述特異性蛋白內切酶包括腸激酶、凝血酶、凝血因子Xa、PreScission蛋白酶、煙草花葉病毒蛋白酶、人鼻病毒蛋白酶或泛素樣小蛋白。
5.根據權利要求2所述的抗菌肽的制備方法，其特征在于，所述蛋白酶作用位點肽段包括DDDDK、LVPRGS、IEGR、IDGR、LEVLFQ、ENLYFQG、LEVLFQG或泛素樣蛋白三級結構。
6.根據權利要求1所述的抗菌肽的制備方法，其特征在于，所述重組載體包括重組質粒，所述重組質粒的表達載體為pFastDual載體。
7.根據權利要求6所述的抗菌肽的制備方法，其特征在于，所述重組載體還包括重組穿梭載體，所述重組穿梭載體是將所述重組質粒轉化到大腸桿菌感受態細胞中，并在重組酶的作用下發生重組所制得的重組Bacmid。
8.根據權利要求7所述的抗菌肽的制備方法，其特征在于，所述重組載體還包括重組病毒，所述重組病毒是通過將所述重組穿梭載體轉染到蠶BmN細胞中制得。
9.根據權利要求8所述的抗菌肽的制備方法，其特征在于，所述宿主細胞為蠶蛹細胞。
10.根據權利要求5所述的抗菌肽的制備方法，其特征在于，在使所述核苷酸序列在所述宿主細胞中表達，得到融合蛋白后，還包括：用特異性蛋白內切酶對所述融合蛋白進行酶切。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于安徽科技學院，未經安徽科技學院許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710995599.0/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
