[發明專利]一種細菌鑒別的方法

有效

• 申請號: 201710992820.7
• 申請日: 2017-10-23
• 公開（公告）號: CN109696431B
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發明（設計）人: 勾洪磊;葛亮皓;王乙潛;徐健
• 申請（專利權）人: 中國科學院青島生物能源與過程研究所
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;C12Q1/04
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 崔佳佳;馬莉華

1.一種細菌鑒別的方法，其特征在于，所述方法包括：

1)對待測細菌樣品施加外源壓力，誘發所述待測細菌樣品的應激反應機制，使待測細菌樣品產生分泌物，所述施加外源壓力選自施加熱激、輻射、高壓、化學固定物質、殺菌劑、和/或抗生素；

2)加入貴金屬納米顆粒吸附所述分泌物，加入誘導團聚試劑，使貴金屬納米顆粒相互團聚，利用表面增強拉曼光譜技術進行檢測獲得拉曼光譜測定結果；

3)將步驟2)獲得的拉曼光譜測定結果與已知細菌分泌物測定的拉曼光譜或者預測的光譜標志進行比對來鑒別所述待測細菌樣品；

所述施加外源壓力的時間為1-60分鐘；所述誘導團聚試劑包括磷酸鹽、鹵素鹽、硫酸鹽、亞硝酸鹽中的一種或多種。

2.根據權利要求1所述的細菌鑒別的方法，其特征在于，所述貴金屬納米顆粒包括金、銀、鉑中的任一種，所述貴金屬納米顆粒的直徑為5-500nm。

3.根據權利要求1-2任一所述的細菌鑒別的方法，其特征在于，所述誘導團聚試劑的濃度為1mM-2M。

4.一種耐藥細菌鑒別的方法，其特征在于，所述方法包括：

1)在待測細菌中加入特定藥物作用于細胞，使待測細菌樣品產生分泌物；

2)加入貴金屬納米顆粒吸附所述分泌物，加入誘導團聚試劑，使貴金屬納米顆粒相互團聚，利用表面增強拉曼光譜技術進行檢測獲得拉曼光譜測定結果；

3)將步驟2)獲得的拉曼光譜測定結果與特定藥物測定的拉曼光譜或者預測的光譜標志進行比對來鑒別測試細菌樣品是否為特定藥物的耐藥菌；

所述誘導團聚試劑包括磷酸鹽、鹵素鹽、硫酸鹽、亞硝酸鹽中的一種或多種。

5.根據權利要求4所述的耐藥細菌鑒別的方法，其特征在于，所述特定藥物為抗生素或者抗菌藥物。

6.根據權利要求4所述的耐藥細菌鑒別的方法，其特征在于，所述特定藥物為β-內酰胺類、氟喹諾酮類、氨基糖苷類或多肽類抗生素藥物。

7.根據權利要求4所述的耐藥細菌鑒別的方法，其特征在于，所述特定藥物為青霉烯或碳青霉烯類抗生素。

8.根據權利要求4所述的耐藥細菌鑒別的方法，其特征在于：所述貴金屬納米顆粒包括金、銀、鉑中的任一種，所述貴金屬納米顆粒的直徑為5-500nm。

9.根據權利要求4-8任一所述的耐藥細菌鑒別的方法，其特征在于，所述誘導團聚試劑的濃度為1mM-2M。

10.根據權利要求4所述的耐藥細菌 鑒別的方法，所述表面增強拉曼光譜技術所采用連續激光波長為266nm-1064nm；激光功率為1-50mW；測量時間為1-60s。