[發明專利]二價乙肝疫苗及其制備方法

有效

• 申請號: 201710992798.6
• 申請日: 2017-10-23
• 公開（公告）號: CN107648602B
• 公開（公告）日: 2020-09-01
• 發明（設計）人: 董晨;郭志榮;劉芳;張鈞;王潔
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: A61K39/295
• 分類號: A61K39/295;A61K39/29;A61P31/20
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 李廣

本發明涉及一種二價乙肝疫苗，以其總體積為基準，包括濃度均為10?60μg/ml的重組野生型乙肝病毒表面抗原(重組w?HBsAg)和重組突變型乙肝病毒表面抗原(重組m?HBsAg)以及氫氧化鋁凝膠溶液，重組w?HBsAg含有野生型HBV的HBsAg或HBsAg氨基酸片段，重組m?HBsAg含有突變的HBsAg或突變的HBsAg氨基酸片段，突變的HBsAg的突變位點為L21S、I126S和G145R。本發明還提供了其制備方法：將重組w?HBsAg和重組m?HBsAg分別與氫氧化鋁凝膠溶液混勻，調節pH至5.5?9.6；將得到的兩種混合物進行混合，得到二價乙肝疫苗。本發明的二價乙肝疫苗能夠誘導針對野生型HBV和常見的突變型HBV(含有L21S、I126S和/或G145R突變)的特異性中和抗體，進而預防和控制乙型肝炎的發生和流行，其制備方法簡單。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，尤其涉及一種二價乙肝疫苗及其制備方法。

背景技術

乙肝病毒(Hepatitis B virus，HBV)引起的慢性感染是全球重要的公共衛生問題，也是我國肝硬化和肝細胞癌的首要病因。據世界衛生組織報道，目前全世界超過20億人感染過HBV，其中至少有3.5億感染人群發展成為慢性乙型肝炎攜帶者。我國是乙型肝炎流行大國，據統計，我國現有3000余萬慢性乙肝患者，而且每年約有30萬人死于慢性乙肝所致的肝硬化/肝癌等相關疾病。由此可見，預防、控制和消滅HBV的傳播和流行具有重要的意義。

乙肝疫苗是預防HBV感染的最有效途徑，完整的乙肝疫苗接種可以對95％以上的嬰幼兒和成年人起保護性作用。HBV是一個包裹著的部分雙鏈環狀DNA分子，其基因組含有4個開放讀碼框架。分別稱為S、C、P、X，S區又分為S基因、preS1基因和preS2基因三段，分別編碼S蛋白、preS1蛋白和preS2蛋白，其中S基因可以刺激機體產生中和性抗體或稱為保護性抗體。目前市場上廣泛使用的基因工程乙肝疫苗正是利用啤酒酵母、CHO細胞等真核表達系統通過表達、純化乙肝表面抗原(HBsAg)制備。

自從1992年乙肝疫苗在我國被納入兒童計劃免疫規劃后，我國新生兒及低年齡組兒童人群HBsAg陽性檢出率均呈現大幅度的下降。HBV感染狀況正逐步得到改善，然而調查發現，在疫苗免疫兒童中仍然存在HBV慢性感染的現象(免疫逃避)。由于這類兒童可能成為潛在的慢性HBV感染人群，因此已成為新的值得關注的焦點問題。進一步研究發現，免疫壓力導致的HBsAg‘a’抗原決定簇變異株的出現是免疫逃避的重要原因。HBV‘a’抗原決定簇由位于HBsAg第124-147位的氨基酸構成。研究表明，‘a’抗原決定簇中I126S和G145R位點突變是最為常見的變異，該兩位點的突變能夠改變HBsAg的空間結構，降低了其與保護性抗體的結合力，逃避現有疫苗保護，從而產生新的感染問題。

HBsAg‘a’抗原決定簇以外區域L21S的突變同樣能夠影響HBsAg的空間結構及其抗原性，造成免疫逃避。最新的研究證實，含有L21S、I126S和/或G145R的HBV突變株在疫苗免疫后人群具有形成水平傳播的風險。而目前并不存在一種能夠有效誘導針對野生型HBV和常見的突變型HBV(含有L21S、I126S和/或G145R突變)的特異性中和抗體的疫苗。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明的目的是提供一種二價乙肝疫苗及其制備方法，本發明的二價乙肝疫苗能夠誘導針對野生型HBV和常見的突變型HBV(含有L21S、I126S和/或G145R突變)的特異性中和抗體，進而預防和控制乙型肝炎的發生和流行，其制備方法簡單。