[發明專利]一種水產養殖用復合微生物菌劑的制備方法

在審

• 申請號: 201710987802.X
• 申請日: 2017-10-21
• 公開（公告）號: CN107603911A
• 公開（公告）日: 2018-01-19
• 發明（設計）人: 石磊;李璐;尹凱欣
• 申請（專利權）人: 石磊
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/16;C02F3/34;C05F11/08;C12R1/125;C12R1/72;C12R1/01;C02F103/20
• 代理公司: 北京風雅頌專利代理有限公司11403
• 代理人: 馬驍

技術領域

本發明涉及生物制品領域，具體涉及一種水產養殖用復合微生物菌劑的制備方法。

背景技術

水體是魚蝦等水產動物生存生長所必須依賴的環境，水質的好壞是水產養殖特別是集約化養殖成敗的關鍵。隨著水產養殖業的迅速發展，水質污染越來越嚴重。養殖水體污染是指由于人類的活動（生產、生活等）、養殖對象自身的分泌物和排泄物、餌料過剩、藥物殘留等因素造成水體破壞，水質因子平衡失調的現象。近年來，我國水產養殖業發展迅速，養殖規模不斷擴大。但是目前我國的水產養殖多數采用的是高密度集約化的養殖模式，苗種放養過量，大量施肥投餌，使殘留餌料、水生生物排泄物及尸體、養殖水體底部沉積物、各種有機無機肥料等富營養因子共處一個水體，進而發生非正常變化，產生有害物質如氨氮、亞硝酸鹽、硫化氫等，引起水產養殖動物發病甚至死亡。而工業污水及生活污水的排放無疑加重了養殖水體的污染，嚴重制約了我國水產養殖業的可持續發展。

由于在養殖過程中常進行過量的施肥投餌，使得大量殘餌、漁用肥料、養殖動物排泄物和生物殘骸所產生的氨氮、亞硝酸鹽、硫化物等成為主要污染物，因此使得養殖水體的自凈能力嚴重下降，使得水產品的微量元素嚴重缺少。

目前應用于水質處理的有物理、化學、生物等修復方法。在本發明中主要使用微生物修復，其是一種利用微生物對環境污染物吸收、代謝降解的技術。

復合微生物菌劑由兩種或兩種以上且互不拮抗的微生物菌種制成的微生物制劑。此類菌劑一般具有種類全、配伍合理、功能性強、經濟效益高等優良特點。

復合微生物菌劑按其制品中特定的微生物種類分為細菌菌劑、放線菌菌劑(如抗生菌類)、真菌菌劑(如菌根真菌類)、固氮藍藻菌劑等；按其作用機理分為根瘤菌類菌劑、固氮菌類菌劑、解磷菌類菌劑、解鉀菌類菌劑；按其制品內含物可分為單純的微生物菌劑和復合(或復混)微生物菌劑等。

總的來說，復合微生物菌肥可以增進土壤肥力、制造和協助農作物吸收營養、增強植物抗病和抗旱能力。

特別的是，目前水產養殖的中水體底部污染嚴重，雖然使用化學藥劑進行處理可以達到較好的效果，但易產生二次污染。

因此，發明一種性能優良的水產養殖用復合微生物菌肥，以此來適應于我國水產養殖業的需求，這將大大推動我國水產養殖的發展。

發明內容

本發明所要解決的技術問題：本發明所要解決的技術問題：針對目前水產養殖的中水體底部污染嚴重，雖然使用化學藥劑進行處理可以達到較好的效果，但易產生二次污染的問題，提供了一種水產養殖用復合微生物菌劑的制備方法。

為解決上述技術問題，本發明采用如下所述的技術方案是：

一種水產養殖用復合微生物菌劑的制備方法，該制備方法包括如下步驟：

（1）將混合菌粉加入初級培養液進行活化并混合培養，得混合菌液，再將混合菌液加入二級培養液中擴大培養至對數生長期，調節OD₆₀₀值，得待干燥混合菌液；

（2）將上述待干燥混合菌液放入離心機中離心，移去上清液，得到沉淀，將沉淀、水及凍干保護劑混合均勻，得菌懸液，將制得的菌懸液移入真空冷凍干燥機中冷凍干燥，得干燥物；

（3）將上述干燥物與干燥物質量4倍的蒸餾水，混勻后離心，移去上層清液，收集下層沉淀，并將下層沉淀干燥恒重后，冷卻，得到復合菌劑的基體；

（4）將上述復合菌劑的基體添加發酵營養液進行發酵，發酵完成后，收集發酵物，將發酵物、混合微量元素添加劑、100目的蛭石混合均勻，靜置，冷凍干燥，粉碎過篩，收集過篩顆粒，得水產養殖用復合微生物菌劑。

所述步驟（1）中混合菌粉中包括枯草芽孢桿菌、產朊假絲酵母及雙歧桿菌，枯草芽孢桿菌、產朊假絲酵母及雙歧桿菌的質量比為2：1：1，初級培養液配方按重量份數計，取牛肉膏1.2~2份、胰酪胨2.5~5份、馬鈴薯全粉8~10份、瓊脂12~15份、葡萄糖1.5~2.5份、NaCl 3~5份、KH₂PO₄ 1.2~2.5份、吐溫-80 0.6~1份、半胱胺酸 0.2~0.8份、水1000 份，pH值7.0 ± 0.2，121 ℃滅菌30min，得初級培養液。