[發(fā)明專利]一種液體發(fā)酵菌種馴化方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710983634.7
• 申請(qǐng)日: 2017-10-20
• 公開（公告）號(hào): CN107641601A
• 公開（公告）日: 2018-01-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張金霞;黃晨陽;肖俊培;汪建黨;侯艷平;閆訓(xùn)友;侯曉強(qiáng);韓美玲;王晶;喬杰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 翔天農(nóng)業(yè)開發(fā)集團(tuán)股份有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;C12N1/36;C12R1/645
• 代理公司: 石家莊新世紀(jì)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司13100
• 代理人: 趙婧

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及食用菌技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種香菇液體發(fā)酵菌種馴化方法。

背景技術(shù)

液體菌種應(yīng)用于食用菌的生產(chǎn)，對(duì)于食用菌行業(yè)從傳統(tǒng)生產(chǎn)上的繁瑣復(fù)雜、周期長(zhǎng)、成本高、憑經(jīng)驗(yàn)、拼勞力、手工作坊式向自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)?；?jí)具有重大意義。

液體菌種接入菌包時(shí)，又具有流動(dòng)性、易分散、萌發(fā)快、發(fā)菌點(diǎn)多等特點(diǎn)，較好的解決了接種過程中萌發(fā)慢、易污染的問題，菌種可進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。常規(guī)制備液體菌種多采用“母種—一級(jí)搖瓶種—二級(jí)搖瓶種—培養(yǎng)（發(fā)酵）器”的生產(chǎn)工藝，環(huán)節(jié)多，操作復(fù)雜，周期長(zhǎng)。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問題，本發(fā)明提供一種環(huán)節(jié)少，操作簡(jiǎn)單，無競(jìng)爭(zhēng)性菌類，周期短成功率高的香菇液體發(fā)酵菌種馴化方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案：

一種香菇液體發(fā)酵菌種馴化方法，將香菇固體的試管菌種轉(zhuǎn)接到一級(jí)液體菌種瓶?jī)?nèi)，一級(jí)液體菌種瓶?jī)?nèi)為斜面培養(yǎng)基，在斜面培養(yǎng)基中加入木塊，木塊浮于斜面培養(yǎng)基上，固體菌種在斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待木塊上長(zhǎng)滿菌絲后，將菌絲取下放入水培養(yǎng)基中，菌絲在18-28℃水培養(yǎng)基中搖床培養(yǎng)2-4天，經(jīng)檢查無競(jìng)爭(zhēng)性菌類感染，靜置培養(yǎng)長(zhǎng)到菌絲斷裂，菌絲斷裂后繼續(xù)在水培養(yǎng)基中靜置培養(yǎng)2-4天，即培養(yǎng)出馴化后的香菇液體發(fā)酵菌種。

優(yōu)選的，所述斜面培養(yǎng)基為以下重量份的組成：馬鈴薯150-300份，麩皮10-30份，玉米粉8-12份，葡萄糖15-25份，蛋白胨1-3份，磷酸二氫鉀1-1.5份，硫酸鎂0.5-1.5份，維生素B1 0.05-0.8份，瓊脂18-20份，水1000份。

優(yōu)選的，水培養(yǎng)基為以下重量份的組成：馬鈴薯100-105份，白糖20-22份，麩皮40-45份，磷酸二氫鉀1-1.3份，硫酸鎂0.5-0.8份，蛋白胨2-3份，維生素B1 0.7-0.8份，水1000份。

優(yōu)選的，所述木塊和斜面培養(yǎng)基的體積比為1:（15-20），所述木塊的大小為0.5-1cm³。

優(yōu)選的，固體菌種在斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為18-28℃，培養(yǎng)時(shí)間為10-24天。

優(yōu)選的，菌絲和水培養(yǎng)基的體積比為1:（200-300）。

本發(fā)明所述馬鈴薯為馬鈴薯塊，所述馬鈴薯塊的大小為0.5-1cm³。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明提供一種環(huán)節(jié)少，操作簡(jiǎn)單，無競(jìng)爭(zhēng)性菌類，周期短成功率高。斜面菌種接種并采用搖瓶進(jìn)行水中二次培養(yǎng)相對(duì)于常規(guī)的液體發(fā)酵菌種的馴化方法的成活率高：常規(guī)30-60%，本方法99.9%以上；常規(guī)的液體發(fā)酵菌種的馴化方法搖瓶培養(yǎng)周期為15天，本方法6天，大大縮短了培養(yǎng)周期。

本發(fā)明的液體菌種接種于發(fā)酵罐的培養(yǎng)周期常規(guī)10天，本發(fā)明6天；液體菌種接種于菌包后的成活率常規(guī)80-90%，本發(fā)明99%以上。

（1）成本低：制種成本是固體的三十分之一；

（2）時(shí)間短：制種時(shí)間一個(gè)月；

（3）萌芽快：接種后6小時(shí)萌發(fā)，24小時(shí)菌絲布滿接種面；

（4）生長(zhǎng)快：栽培養(yǎng)菌時(shí)間比固體縮短1/2；

（5）純度高：菌種純度高、活力強(qiáng)；

（6）污染少：菌種萌發(fā)速度快，競(jìng)爭(zhēng)性菌類幾乎沒有侵染機(jī)會(huì)；

（7）菌齡短：菌包上下菌齡一致，出菇齊、產(chǎn)量高。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

一種香菇液體發(fā)酵菌種馴化方法，將香菇實(shí)體進(jìn)行組織分離培養(yǎng)，生產(chǎn)出固體菌種，再將固體菌種轉(zhuǎn)接到一級(jí)液體菌種瓶?jī)?nèi)，一級(jí)液體菌種瓶?jī)?nèi)為斜面培養(yǎng)基，在斜面培養(yǎng)基中加入木塊，木塊浮于斜面培養(yǎng)基上，固體菌種在斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待木塊上長(zhǎng)滿菌絲后，將菌絲取下放入水培養(yǎng)基中，菌絲在18-28℃水培養(yǎng)基中搖床培養(yǎng)2-4天，經(jīng)檢查無競(jìng)爭(zhēng)性菌類感染，靜置培養(yǎng)長(zhǎng)到菌絲斷裂，菌絲斷裂后繼續(xù)在水培養(yǎng)基中靜置培養(yǎng)2-4天，即培養(yǎng)出馴化后的香菇液體發(fā)酵菌種。

所述斜面培養(yǎng)基為以下重量份的組成：馬鈴薯150-300份，麩皮10-30份，玉米粉8-12份，葡萄糖15-25份，蛋白胨1-3份，磷酸二氫鉀1-1.5份，硫酸鎂0.5-1.5份，維生素B1 0.05-0.8份，瓊脂18-20份，水1000份。

水培養(yǎng)基為以下重量份的組成：馬鈴薯100-105份，白糖20-22份，麩皮40-45份，磷酸二氫鉀1-1.3份，硫酸鎂0.5-0.8份，蛋白胨2-3份，維生素B1 0.7-0.8份，水1000份。

所述木塊和斜面培養(yǎng)基的體積比為1:15，所述木塊的大小為0.5cm³。