[發(fā)明專利]利用群體感應分子誘導從樺褐孔菌中提取三萜類物質方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710981074.1
• 申請日: 2017-10-19
• 公開（公告）號: CN107841523A
• 公開（公告）日: 2018-03-27
• 發(fā)明（設計）人: 陳啟和;李豪;吳嘉南;牛永武
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12P33/00
• 分類號: C12P33/00;C12P5/02;C12N1/14;C12N1/38;C12R1/645
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司33224
• 代理人: 沈自軍

1.一種利用群體感應分子誘導從樺褐孔菌中提取三萜類物質方法，包括：將活化的樺褐孔菌(Inonotus obliquus)CFCC 83414接入液體培養(yǎng)基，于24-26℃發(fā)酵培養(yǎng)8-14天，在發(fā)酵第5-8天加入群體感應分子，發(fā)酵完成后，分離菌體和發(fā)酵液，通過后處理從菌體和發(fā)酵液中分離純化得到三萜類物質；

其中，所述群體感應分子為法尼醇、色醇、對羥基苯乙醇、苯乙醇、茴香腦和香葉醇中的至少一種；

所述三萜類物質為白樺脂醇、白樺脂酸、角鯊烯和羊毛甾醇中的至少一種。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述液體培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖合成培養(yǎng)基和麩皮水浸提液的混合物。

3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述發(fā)酵采用三角瓶發(fā)酵，發(fā)酵時間為11-14天；培養(yǎng)時，前2-3天轉速設為0rpn/min，然后再以90-110rpn/min的轉速培養(yǎng)2-3天，之后再以150-180r/min的轉速培養(yǎng)。

4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述群體感應分子為法尼醇。

5.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于，所述法尼醇的加入時間為發(fā)酵第6-7天。

6.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于，以每升發(fā)酵液計，所述法尼醇的添加量為0-300μmol。

7.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述后處理包括將菌體破碎后用乙醇溶液萃取，同時將發(fā)酵液用水飽和的正丁醇萃取，之后合并萃取液，濃縮，得到三萜類物質。

8.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述三萜類物質為白樺脂酸。

9.根據(jù)權利要求8所述的方法，其特征在于，所述后處理包括將菌體破碎后用乙醇溶液萃取，同時將發(fā)酵液用乙酸乙酯萃取，之后合并萃取液，濃縮，得到白樺脂酸。

10.根據(jù)權利要求7或9所述的方法，其特征在于，萃取方法為：置于23-27℃下超聲提取0.8-1.2h。