[發明專利]一種檢測甲狀腺球蛋白濃度的試紙條及其制備方法

在審

• 申請號: 201710978759.0
• 申請日: 2017-10-19
• 公開（公告）號: CN107870234A
• 公開（公告）日: 2018-04-03
• 發明（設計）人: 朱富強
• 申請（專利權）人: 施康培醫療科技（武漢）有限公司;王玨
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/532;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司11212
• 代理人: 楊立,陳璐

1.一種檢測甲狀腺球蛋白濃度的試紙條，其特征在于，包括橫向水平設置的條形的硝酸纖維素膜(3)，所述醋酸纖維膜(3)上縱向間隔且相互平行的分別設置有一個條形的檢測線(4)和一個條形的質控線(5)，所述檢測線(4)和質控線(5)的兩端分別與所述硝酸纖維素膜(3)的兩側邊平齊，其中所述硝酸纖維素膜(3)靠近質控線(5)一端抵接有一橫向水平設置的條形的吸水墊(6)，所述硝酸纖維素膜(3)靠近檢測線(4)的一端抵接有一橫向水平設置的條形的膠體金墊(2)，所述膠體金墊(2)遠離硝酸纖維素膜(3)的一端抵接有一橫向水平設置的條形的樣品墊(1)，所述樣品墊(1)、膠體金墊(2)、硝酸纖維素膜(3)和吸水墊(6)的兩側邊均平齊；

所述膠體金墊(2)內含有膠體金標記配對的抗人甲狀腺球蛋白抗體，所述檢測線(4)包被有可與抗人甲狀腺球蛋白抗體特異性結合的檢測抗體，質控線(5)包被有可與游離的抗人甲狀腺球蛋白抗體特異性結合的質控抗體。

2.根據權利要求1所述的檢測甲狀腺球蛋白濃度的試紙條，其特征在于，所述樣品墊(1)是由處理液處理的玻璃纖維膜于室溫相對濕度為15-30％的條件下干燥并密封保存而得到的，其中所述處理液包括0.01M PBS、0.1wt％Tween-20、1wt％牛血清白蛋白、10wt％蔗糖。

3.根據權利要求1所述的檢測甲狀腺球蛋白濃度的試紙條，其特征在于，所述樣品墊(1)包括經紅細胞單抗處理后的纖維玻纖膜和濾血膜，所述濾血膜壓覆在所述纖維玻纖膜下端，用以對全血樣品中的血細胞進行過濾；其中，纖維玻纖膜和濾血膜的邊緣有2-4mm重疊，將所述纖維玻纖膜和濾血膜制得的樣品墊(1)置于室溫相對濕度為15-30％的條件下干燥并密封保存而得到。

4.根據權利要求1所述的檢測甲狀腺球蛋白濃度的試紙條，其特征在于，所述吸水墊為吸水紙。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的檢測甲狀腺球蛋白濃度的試紙條，其特征在于，所述檢測抗體為TG抗體；所述質控抗體為羊抗鼠IgG。

6.根據權利要求5所述的檢測甲狀腺球蛋白濃度的試紙條，其特征在于，還包括一個條形的底板(7)，所述樣品墊(1)、膠體金墊(2)、硝酸纖維素膜(3)和吸水墊(6)沿底板(7)長度方向依次鋪設在所述底板(7)上端。

7.一種如權利要求6所述的試紙條的制備方法，其特征在于，步驟如下：

將樣品墊(1)、膠體金墊(2)、硝酸纖維素膜(3)和吸水墊(6)依次沿底板(7)長度方向粘附在所述底板(7)上端，且樣品墊(1)與膠體金墊(2)相互靠近一側相互抵接，所述膠體金墊(2)與硝酸纖維素膜(3)相互靠近一端相互抵接，所述硝酸纖維素膜(3)與吸水墊(6)相互靠近的一端的相互抵接。

8.根據權利要求7所述的試紙條的制備方法，其特征在于，所述硝酸纖維素膜(3)的TG抗體用濃度為0.01M且pH為7.4的磷酸鹽緩沖液配制成濃度為0.5-2mg/mL的抗體溶液，將其以1.0-2.0uL/cm的噴涂量用噴膜儀在硝酸纖維素膜(3)上進行劃線作為檢測線(4)，同時將羊抗鼠IgG用濃度為0.01M且pH為7.4的磷酸鹽緩沖液配制成濃度為1-2mg/mL的抗體溶液，將其以1.0-2.0uL/cm的噴涂量用噴膜儀在硝酸纖維素膜(3)上進行劃線作為質控線(5)，將涂有TG抗體和羊抗鼠IgG抗體的硝酸纖維素膜(3)置于室溫且相對濕度濕度為15-30％的條件下干燥并密封保存備用。

9.根據權利要求7所述的試紙條的制備方法，其特征在于，所述膠體金墊(2)的制備：取膠體金原液用濃度為0.2M的K₂C0₃溶液調至pH6.5-8.0，再加入標記用的抗人甲狀腺球蛋白抗體，其中，標記用的抗人甲狀腺球蛋白抗體的用量與膠體金原液的用量之比為1-4ug：20mL，室溫攪拌1小時，用酪蛋白或者牛血清蛋白封閉，12000-13000r/min離心30分鐘，棄上清液，用膠體金工作液復溶沉淀物至膠體金原液體積用量的70％，然后用噴金機均勻地噴涂在聚酯膜上，并將噴涂后的聚酯膜置于室溫且相對濕度15-30％的條件下干燥并密封保存備用。

10.根據權利要求9所述的試紙條的制備方法，其特征在于，所述膠體金原液為采用氯金酸-檸檬酸三鈉法制備的直徑30±5nm的膠體金溶液；所述膠體金工作液包括1wt％牛血清白蛋白、0.1M Tris-HCL緩沖液和20wt％蔗糖，且pH為8.0。