[發(fā)明專利]一種從北葶藶子中提取硫苷黃酮類化合物的方法及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710978414.5
• 申請(qǐng)日: 2017-10-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107602629A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-01-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭曉珂;李孟;曾夢(mèng)楠;張靖柯;趙璇;呂錦錦;張志廣;馮衛(wèi)生
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河南中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): C07H1/08
• 分類號(hào): C07H1/08;C07H17/07;A61P5/30
• 代理公司: 鄭州天陽(yáng)專利事務(wù)所(普通合伙)41113
• 代理人: 聶孟民

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種從北葶藶子中提取硫苷黃酮類化合物的方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

葶藶子為常用中藥材，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為草部下品，該藥味辛、苦，性大寒，歸肺與膀胱經(jīng)，具有宣泄平喘、行水消腫的功效。2015版《中國(guó)藥典》收錄的“葶藶子”有南北之分，其中十字花科植物獨(dú)行菜Lepidium apetalum Willd.的干燥成熟種子習(xí)稱“北葶藶子”，而播娘蒿Descurainia Sophia(L.)Webbex Prantl.的干燥成熟種子習(xí)稱“南葶藶子”。

隨著對(duì)北葶藶子有效活性成分和藥用價(jià)值的研究，含有諸多的藥用活性成分，包括北葶新黃酮A和北葶新黃酮B，但如何從北葶藶子中提取出來(lái)，并具有什么樣的功效至今未見(jiàn)有公開(kāi)報(bào)導(dǎo)。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種從北葶藶子中提取硫苷黃酮類化合物的方法及其應(yīng)用，可有效解決從北葶藶子中提取北葶新黃酮A和北葶新黃酮B，并實(shí)現(xiàn)在制備雌激素樣作用藥物中的應(yīng)用問(wèn)題。

本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，一種從北葶藶子中提取的硫苷黃酮類化合物為北葶新黃酮A和北葶新黃酮B，分子結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1所示，其制備方法是，將北葶藶子230-260℃炒制5-6min，炒制后，每次加北葶藶子10倍重量的水煎煮提取三次，每次1.5h，合并三次提取液，減壓濃縮至相當(dāng)于含生藥2g/mL的浸膏狀，在室溫條件下，浸膏加入浸膏5倍體積量、體積濃度為80％的乙醇醇沉，靜置1h，將上清液倒出，再次加入浸膏5倍體積量、體積濃度為80％的乙醇醇沉，如此反復(fù)操作4次，合并上清液，濃縮至無(wú)醇味，上Dianion HP-20柱，依次用水、體積濃度20％、40％、60％乙醇梯度洗脫，流速6mL/min，每個(gè)部位的流動(dòng)相用量為柱體積的10倍；收集60％乙醇洗脫液，濃縮干燥，得60％乙醇洗脫部位組分A；組分A用組分A 5倍重量的水溶解，在20℃下6000r/min離心15min，所得上清液記為水溶物組分B1，離心之后的沉淀記為水不溶物組分B2；組分B2用甲醇溶解，硅膠拌樣，組分B2與硅膠重量比1:1，以二氯甲烷和甲醇的混合液為流動(dòng)相梯度洗脫，流速10mL/min，所用二氯甲烷和甲醇混合液的比例依次為100:0、20:1、10:1、5:1、1:1，每200ml檢識(shí)一次，每個(gè)梯度流動(dòng)相的用量以茴香醛-濃硫酸薄層檢識(shí)來(lái)判斷，3d洗脫完畢，合并二氯甲烷：甲醇＝20:1的流份，標(biāo)為組分C2；組分C2用70％甲醇溶解，通過(guò)Sephadex LH-20柱色譜，用70％甲醇洗脫，流速0.8mL/min，以茴香醛-濃硫酸薄層檢識(shí)，合并210-240mL的流份標(biāo)為組分F4，組分F4用半制備HPLC分離，上規(guī)格型號(hào)：250×10mm、粒徑5μm、孔徑12nm的YMC-Pack ODS-AA色譜柱，流動(dòng)相為體積比25：75的乙腈：三氟乙酸水溶液，三氟乙酸水溶液質(zhì)量濃度為0.03％(即3g三氟乙酸加水至10000mL制成)，流速3ml/min，收集保留時(shí)間t_R＝32.0～33.0min的流份，濃縮干燥，得化合物北葶新黃酮A，收集保留時(shí)間t_R＝38.0～39.0min的流份，濃縮干燥，得化合物北葶新黃酮B。

本發(fā)明方法提取的北葶新黃酮A和北葶新黃酮B具有雌激素樣作用，有效用于制備雌激素樣作用的藥物。

本發(fā)明原料豐富，制備方法科學(xué)，易操作，可有效解決從北葶藶子中提取硫苷黃酮類化合物北葶新黃酮A和北葶新黃酮B，開(kāi)拓了北葶藶子的藥用價(jià)值和商業(yè)價(jià)值，經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益顯著。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明提取物北葶新黃酮A和北葶新黃酮B的分子結(jié)構(gòu)式圖。

圖2為本發(fā)明化合物北葶新黃酮A的¹H-NMR譜(in DMSO-d₆)圖。

圖3為本發(fā)明化合物北葶新黃酮A的¹³C-NMR譜(in DMSO-d₆)圖。

圖4為本發(fā)明化合物北葶新黃酮A的DEPT 135譜(DMSO-d₆)圖。

圖5為本發(fā)明化合物北葶新黃酮A的¹H-¹H COSY譜圖。

圖6為本發(fā)明化合物北葶新黃酮A的HSQC譜圖。

圖7為本發(fā)明化合物北葶新黃酮A的HMBC譜圖。

圖8為本發(fā)明化合物北葶新黃酮A的NOESY譜圖。

圖9為本發(fā)明化合物北葶新黃酮A的IR譜圖。