[發(fā)明專利]一種核酸適配體熒光試紙條及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710969466.6
• 申請(qǐng)日: 2017-10-17
• 公開（公告）號(hào): CN107796938B
• 公開（公告）日: 2020-03-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳愛亮;張桂蘭;朱超;楊曙明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所
• 主分類號(hào): G01N33/533
• 分類號(hào): G01N33/533;G01N33/559
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李佳

1.一種核酸適配體熒光試紙條，其特征在于，包括底板、樣品墊、經(jīng)氧化石墨烯改性的玻璃纖維膜、反應(yīng)膜以及吸水墊，所述樣品墊、所述經(jīng)氧化石墨烯改性的玻璃纖維膜、所述反應(yīng)膜以及所述吸水墊的端部依次連接形成檢測(cè)層，所述檢測(cè)層與所述底板連接，所述反應(yīng)膜設(shè)有檢測(cè)線和質(zhì)控線，所述檢測(cè)線設(shè)置于靠近所述經(jīng)氧化石墨烯改性的玻璃纖維膜的一端，所述質(zhì)控線設(shè)置于靠近所述吸水墊的一端；

所述經(jīng)氧化石墨烯改性的玻璃纖維膜附著有熒光素標(biāo)記的核酸適配體和/或熒光標(biāo)記的帶有連接序列的核酸適配體以及游離熒光素，所述檢測(cè)線固定有所述核酸適配體的互補(bǔ)鏈或所述核酸適配體連接序列的互補(bǔ)鏈，所述質(zhì)控線處設(shè)置有與所述熒光素相對(duì)應(yīng)的抗熒光素抗體；

所述核酸適配體連接序列包括polyTn、polyAn、polyCn及polyGn中的一種，相對(duì)應(yīng)的所述核酸適配體連接序列的互補(bǔ)鏈包括polyAn、polyTn、polyGn及polyCn中的一種，其中n為6～25的整數(shù)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核酸適配體熒光試紙條，其特征在于，所述熒光素選自花青素5(Cy5)或羧基熒光素(FAM)。

3.一種如權(quán)利要求1或2所述的核酸適配體熒光試紙條的制備方法，其特征在于，包括：將所述樣品墊、所述經(jīng)氧化石墨烯改性的玻璃纖維膜、所述反應(yīng)膜以及所述吸水墊依次粘貼至所述底板的同一側(cè)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸適配體熒光試紙條的制備方法，其特征在于，所述經(jīng)氧化石墨烯改性的玻璃纖維膜的制備方法包括：將氧化石墨烯懸浮溶液噴灑至玻璃纖維素膜，在110～130℃的條件下干燥7～9h即得納米材料，將所述熒光素標(biāo)記的核酸適配體及游離熒光素滴加至所述納米材料，反應(yīng)15～25min，在35～40℃的條件下干燥。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的核酸適配體熒光試紙條的制備方法，其特征在于，所述反應(yīng)膜的制備方法包括：將生物素修飾的所述核酸適配體的互補(bǔ)鏈或所述核酸適配體連接序列的互補(bǔ)鏈與親和素孵育25～35min，噴至所述檢測(cè)線處。

6.如權(quán)利要求1或2所述的核酸適配體熒光試紙條在食品安全、環(huán)境監(jiān)測(cè)以及臨床診斷中的檢測(cè)應(yīng)用。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述核酸適配體熒光試紙條在檢測(cè)磺胺二甲氧嘧啶的應(yīng)用。